[发明专利]一种提高乙型脑炎病毒效价的方法有效
| 申请号： | 201310058501.0 | 申请日： | 2013-02-25 |
| 公开（公告）号： | CN103160477A | 公开（公告）日： | 2013-06-19 |
| 发明（设计）人： | 张桂红;陶柏辉;徐雷;王和平;黄岚芬 | 申请（专利权）人： | 湖南中岸生物药业有限公司 |
| 主分类号： | C12N7/00 | 分类号： | C12N7/00;A61K39/12;A61P31/14 |
| 代理公司： | 北京风雅颂专利代理有限公司 11403 | 代理人： | 李弘 |
| 地址： | 410000 湖南省*** | 国省代码： | 湖南;43 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 提高 脑炎 病毒 方法 | ||
1.一种乙型脑炎病毒增殖的方法，该方法包括培养细胞后，向已长满单层的细胞接种乙型脑炎种毒，其特征在于，接种后，待细胞病变达到75-95%时直接收获病毒液。
2.根据权利要求1所述的方法，其中，所接种的乙型脑炎种毒是细胞维持液量的0.5-1体积%。
3.根据权利要求1所述的方法，其中，所述细胞为地鼠肾细胞，所述培养细胞的方法包括对采集到的地鼠肾组织进行胰酶消化，分离细胞移入培养液后进行转动培养；所述胰酶消化包括向采集到的地鼠肾组织中加入胰酶后，置于6-12℃下消化9-12小时。
4.根据权利要求3所述的方法，其中，所加入的胰酶与地鼠肾组织的体积比为2-3.5：1，进行胰酶消化的温度为8-10℃，时间为9.5-10.5小时。
5.根据权利要求3所述的方法，其中，进行胰酶消化前，用7-8质量%NaHCO3将胰酶的PH调节为7.2—7.4。
6.根据权利要求3所述的方法，其中，进行培养的温度为35.5-38.5℃，进行培养的细胞浓度为1.8-2.5×108个/L的细胞数量。
7.根据权利要求3-6中任意一项所述的方法，其中，所述培养液为含10%犊牛血清和100单位/ml的双抗的乳汉液。
8.根据权利要求7所述的方法，其中，所述培养液还含有RPMI1640，且乳汉液与RPMI1640的体积比为1：0.8-1.2。
9.一种制备乙型脑炎疫苗的方法，该方法包括用乙型脑炎病毒进行配苗，其特征在于，该乙型脑炎病毒由前述任意一项权利要求所述的方法制得。
10.根据权利要求9所述的方法，其中，所述乙型脑炎疫苗为灭活疫苗和/或减毒活疫苗。
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