[发明专利]抑制上皮性卵巢癌肿瘤生长的siRNA及其重组载体与应用有效
| 申请号： | 201310064757.2 | 申请日： | 2013-03-01 |
| 公开（公告）号： | CN103146703A | 公开（公告）日： | 2013-06-12 |
| 发明（设计）人： | 刘善荣;惠宁;高原;刘淑鹏;余喜亚;胡晶晶 | 申请（专利权）人： | 中国人民解放军第二军医大学 |
| 主分类号： | C12N15/113 | 分类号： | C12N15/113;C12N15/85;C12N15/66;A61K48/00;A61P35/00 |
| 代理公司： | 上海元一成知识产权代理事务所(普通合伙) 31268 | 代理人： | 赵青 |
| 地址： | 200433 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 抑制 上皮 卵巢癌 肿瘤 生长 sirna 及其 重组 载体 应用 | ||
1.一种抑制上皮性卵巢癌HOST2基因表达的干扰序列，其RNA序列如SEQ ID NO:4或5所示。
2.一种含有如权利要求1所述的抑制上皮性卵巢癌HOST2基因表达的干扰序列的重组载体。
3.根据权利要求2所述的重组载体，其特征在于，该重组载体采用真核表达载体pLKO.1puro构建。
4.根据权利要求3所述的重组载体，其特征在于，构建方法如下：
A、合成HOST2-sh2片段；
选择合适的酶切位点Age I和EcoR I，根据该siRNA2的序列，设计其shRNA2序列如下：
正义链5'CCGGTGACTAAACAAGGTCTTAATTT—CTCGAG—ATTAAGACCTTGTTTAGTCTT—TTTTTG3'（SEQ ID NO:8）
反义链5'AATTCAAAAAGACTAAACAAGGTCTTAATTT—CTCGAG—ATTAAGACCTTGTTTAGTCTT—A3'（SEQ ID NO:9）；
B、退火得到HOST2-sh2cDNA基因片段；
C、用真核表达载体pLKO.1puro构建pLKO.1-HOST2-sh2重组表达载体。
5.根据权利要求4所述的重组载体，其特征在于，构建pLKO.1-HOST2-sh2重组表达载体后，将pLKO.1-HOST2-sh2重组质粒转染入OVCAR-3细胞并且利用G418加压筛选，建立OVCAR-3/HOST2-sh2T真核表达细胞株。
6.一种抑制上皮性卵巢癌HOST2基因表达的干扰序列在制备治疗上皮性卵巢癌药物中的应用。
7.一种如权利要求2至5任一所述的重组载体在制备治疗上皮性卵巢癌药物中的应用。
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