[发明专利]抑制上皮性卵巢癌肿瘤生长的siRNA及其重组载体与应用

说明书

技术领域

本发明属于基因工程技术领域，具体涉及一种可以抑制上皮性卵巢癌特异性相关基因表达的干扰序列及其重组载体，以及在制备治疗上皮性卵巢癌药物中的应用。

背景技术

上皮性卵巢癌（Epithelial Ovarian Cancer，EOC）是最常见的卵巢癌，约占80-90%，在妇科生殖器官恶性肿瘤中，虽然发病率位居第三，仅次于宫颈癌与子宫内膜癌，但死亡率高达70%，居首位。据统计，女性一生中发生卵巢癌的危险率约1.45%，死于卵巢癌的危险性为1%。由于卵巢解剖位置复杂，位于盆底深部，这给卵巢癌的早期诊断造成诸多困难。目前EOC的治疗以手术为主，辅以放化疗等。但由于转移前常无症状，多数EOC在确诊时已属于晚期，致使手术难度高、范围广，病灶往往不能全部清除，再加上放化疗作用局限，导致术后复发率高，预后极差。据近20年的统计资料，EOC的发病率逐年递增，但治疗效果一直未能改善，5年生存率徘徊于30-40%。EOC已成为严重威胁妇女生命和健康的主要肿瘤，如何改善EOC的治疗效果是妇科肿瘤学家面临的最严峻挑战之一。大量文献报道，分子靶向药物和化疗联合应用是目前提高恶性肿瘤患者生存率最有前景的治疗方法。

2003年，Rangel等人利用SAGE数据库分析、基因克隆、Northern Blot、RACE技术等，在EOC组织中发现一个特异性转录本HOST2（Rangel L.B.,Sherman-Baust C.A.,Wernyj R.P.,Schwartz D.R.,Cho K.R.,Morin P.J..Characterization of novel human ovarian cancer-specific transcripts(HOSTs)identified by serial analysis of gene expression.Oncogene.2003,22(46):7225-7232.）。HOST2长度约3000个碱基，没有开放式可读框，不能编码蛋白质，属于长链非编码RNA（Long noncoding RNA，LncRNA）。

长链非编码RNA（Long noncoding RNA，LncRNA）是一类长度大于200个碱基的功能性RNA分子，占人类基因组4-9%，缺乏编码蛋白的能力，在多种层面上调控其他基因的表达，参与细胞内诸多生物过程。目前许多研究表明，LncRNA广泛参与机体多种生理病理过程，其特异性表达和/或表达变化与恶性肿瘤的发生发展密切相关（Lee,J.T..Epigenetic regulation by long noncoding RNAs.Science.2012.338(6113):1435-1439.）。目前有文献报道，LncRNA特异性表达可作为治疗肿瘤潜在靶点，如肝细胞性肝癌中的LncRNA——MVIH（Yuan,S.X.,Yang,F.,Yang,Y.,Tao,Q.F.,Zhang,J.,Huang,G.,Wang,R.Y.,Yang,S.,Huo,X.S.,Zhang,L.,Wang F.,Sun S.H.,Zhou W.P..Long noncoding RNA associated with microvascular invasion in hepatocellular carcinoma promotes angiogenesis and serves as a predictor for hepatocellular carcinoma patients'poor recurrence-free survival after hepatectomy.Hepatology.2012.56(6):2231-2241.）。但目前尚无HOST2的深入研究报道。

发明内容

本发明的目的在于提供一种抑制上皮性卵巢癌HOST2基因表达的干扰序列，并构建含有抑制上皮性卵巢癌HOST2基因表达的干扰序列的重组载体，本发明的另一目的是提供该siRNA2和重组载体在制备治疗上皮性卵巢癌药物中的应用。

本发明的第一方面，是寻找能抑制上皮性卵巢癌HOST2基因表达的干扰序列。

本发明人通过大量前期工作发现：HOST2与上皮性卵巢癌的增殖和迁移这两个肿瘤生长相关的生物学功能密切相关。