[发明专利]产共轭亚油酸的食品级重组乳酸乳球菌及其构建方法与应用

权利要求书

1.重组乳酸乳球菌，其特征在于：所述重组乳酸乳球菌是乳酸乳球菌（Lactococcus lactis）PAI-75，其在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的登记入册编号为CGMCC No.7148。

2.构建重组乳酸乳球菌的方法，包括将蛋白质PAI的编码基因导入作为宿主菌的乳酸乳球菌中得到反式-10，顺式-12共轭亚油酸的转化效率高于所述宿主菌的重组乳酸乳球菌的步骤；

所述蛋白质PAI为如下a）或b）的蛋白质：

a）由SEQ ID No.2所示的氨基酸序列组成的蛋白质；

b）将SEQ ID No.2的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有亚油酸异构酶活性，或具有亚油酸异构酶活性由a）衍生的蛋白质。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：所述蛋白质PAI的编码基因为如下1）或2）或3）的DNA分子：

1）其编码序列是SEQ ID No.1的DNA分子；

2）在严格条件下与1）限定的DNA分子杂交且编码所述蛋白质PAI的DNA分子；

3）与1）限定的DNA分子具有90％以上的一致性且编码所述蛋白质PAI的DNA分子。

4.根据权利要求2或3所述的方法，其特征在于：所述宿主菌为食品级乳酸乳球菌和/或其衍生菌；

所述蛋白质PAI的编码基因通过重组食品级表达载体导入所述宿主菌中。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于：所述食品级乳酸乳球菌为乳酸乳球菌NZ3900或其衍生菌株、和/或乳酸乳球菌MG1363或其衍生菌、和/或乳酸乳球菌LM0230或其衍生菌、和/或乳酸乳球菌IL1403或其衍生菌，所述重组食品级表达载体为权利要求8或9所述的重组食品级表达载体。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于：所述重组乳酸乳球菌为乳酸乳球菌（Lactococcus lactis）PAI-75，其在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的登记入册编号为CGMCC No.7148。

7.由权利要求2-5中任一所述方法构建的反式-10，顺式-12共轭亚油酸的转化效率高于所述宿主菌的重组乳酸乳球菌。

8.表达权利要求2或3所述蛋白质PAI的编码基因的重组食品级表达载体。

9.根据权利要求8所述的重组食品级表达载体，其特征在于：所述重组食品级表达载体是将权利要求2或3所述蛋白质PAI的编码基因插入pNZ8149的多克隆位点得到的重组表达载体。

10.权利要求1所述的重组乳酸乳球菌或权利要求2-5中任一所述方法构建的重组乳酸乳球菌在生产反式-10，顺式-12共轭亚油酸中的应用。