[发明专利]核酸和检测转基因水稻B2A68及其衍生系的方法以及试剂盒及其用途有效
| 申请号： | 201310068126.8 | 申请日： | 2013-03-04 |
| 公开（公告）号： | CN104031912B | 公开（公告）日： | 2017-05-03 |
| 发明（设计）人： | 肖国樱;蒋利平;翁绿水 | 申请（专利权）人： | 中国科学院亚热带农业生态研究所 |
| 主分类号： | C12N15/11 | 分类号： | C12N15/11;C12Q1/68 |
| 代理公司： | 北京润平知识产权代理有限公司11283 | 代理人： | 王凤桐,周建秋 |
| 地址： | 410125*** | 国省代码： | 湖南;43 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 核酸 检测 转基因 水稻 b2a68 及其 衍生 方法 以及 试剂盒 用途 | ||
1.一种核酸，该核酸为转基因水稻B2A68的旁侧序列所示的核酸，所述转基因水稻B2A68的旁侧序列为SEQ ID NO.1或SEQ ID NO.1的片段，SEQ ID NO.6或SEQ ID NO.6的片段；其中，SEQ ID NO.1的片段至少包括SEQ ID NO.1的第100-141位的序列，SEQ ID NO.6的片段至少包括SEQ ID NO.6的第1520-1561位的序列。
2.根据权利要求1所述的核酸，所述SEQ ID NO.1的片段至少包括SEQ ID NO.1的第90-151位的序列。
3.根据权利要求1或2所述的核酸，所述SEQ ID NO.1的片段至少包括SEQ ID NO.1的第80-161位的序列。
4.根据权利要求1所述的核酸，所述SEQ ID NO.6的片段至少包括SEQ ID NO.6的第1510-1571位的序列。
5.根据权利要求1或4所述的核酸，所述SEQ ID NO.6的片段至少包括SEQ ID NO.6的第1500-1581位的序列。
6.一种检测转基因水稻的方法，该转基因水稻为转基因水稻B2A68或者由B2A68杂交产生的含有权利要求1-5中任意一项所述的核酸的转基因水稻B2A68的衍生系，该方法包括：
(1)使用针对权利要求1-5中任意一项所述的核酸的特异性引物，对取自待测水稻的核酸样品进行PCR扩增，得到PCR扩增后的产物；
(2)检验所述PCR扩增后的产物中是否含有所述特异性引物扩增产生的特异性目的片段；如果所述PCR扩增后的产物中含有所述特异性目的片段，则指示所述待测水稻为所述转基因水稻B2A68或者由B2A68杂交产生的含有权利要求1-5中任意一项所述的核酸的转基因水稻B2A68的衍生系。
7.根据权利要求6所述的方法，其中，所述特异性引物为SEQ ID NO.16所示的核酸和SEQ ID NO.17所示的核酸；所述特异性引物扩增产生的目的片段的长度为307bp。
8.根据权利要求7所述的方法，其中，PCR扩增的条件包括退火温度为55-60℃。
9.根据权利要求6所述的方法，其中，所述特异性引物为SEQ ID NO.18所示的核酸和SEQ ID NO.19所示的核酸；所述特异性引物扩增产生的目的片段的长度为521bp。
10.根据权利要求9所述的方法，其中，PCR扩增的条件包括退火温度为52-58℃。
11.一种试剂盒，该试剂盒包括右侧特异性引物和/或左侧特异性引物，其中，所述右侧特异性引物为SEQ ID NO.16所示的核酸和SEQ ID NO.17所示的核酸；所述左侧特异性引物为SEQ ID NO.18所示的核酸和SEQ ID NO.19所示的核酸。
12.根据权利要求11所述的试剂盒，其中，所述试剂盒还包括阳性对照核酸，所述阳性对照核酸为SEQ ID NO.1所示的核酸和/或SEQ ID NO.6所示的核酸。
13.根据权利要求11或12所述的试剂盒，其中，所述试剂盒还包括dNTPs、PCR缓冲液和耐高温DNA聚合酶。
14.权利要求11-13中任意一项所述的试剂盒在检测转基因水稻B2A68或者由B2A68杂交产生的含有权利要求1-5中任意一项所述的核酸的转基因水稻B2A68的衍生系中的用途。
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