[发明专利]黄芪颗粒指纹图谱的测定方法及其特征指纹图谱

权利要求书

1.一种黄芪颗粒指纹图谱的测定方法，其特征在于：包括以下步骤：

（1）供试品溶液的制备：取黄芪颗粒粉碎，过筛，称取粉末，加甲醇溶液溶解，超声提取1～2次，每次5～30min，然后冷却，补足损失重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液；

（2）对照品溶液的制备：取减压干燥至恒重的毛蕊异黄酮苷、芒柄花苷、毛蕊异黄酮、芒柄花素对照品，分别加入甲醇制成对照品溶液；

（3）测定：分别精密吸取供试品溶液和对照品溶液，注入高效液相色谱仪测定，记录色谱图；供试品溶液注入高效液相色谱仪后，以甲醇-0.5%甲酸水为流动相进行梯度洗脱；

（4）用指纹图谱软件对所得的图谱进行处理，即得到黄芪颗粒特征指纹图谱。

2.根据权利要求1所述黄芪颗粒指纹图谱的测定方法，其特征在于：高效液相色谱测定时的色谱条件为：色谱柱为Agilent ZORBAX SB-C₁₈色谱柱；流动相A为甲醇，流动相B为0.5%甲酸水，A∶B=2%-90%∶98%-10%；流速1mL·min^-1；柱温30℃；检测波长254nm。

3.根据权利要求1所述黄芪颗粒指纹图谱的测定方法，其特征在于：供试品溶液的制备过程为：取黄芪颗粒粉碎，过60目筛，精密称取粉末1.0g，加入10%甲醇溶液10mL溶解，超声提取5min，然后冷却，补足损失重量，摇匀，滤过，取续滤液过0.45μm微孔滤膜，即得供试品溶液。

4.根据权利要求1所述黄芪颗粒指纹图谱的测定方法，其特征在于：对照品溶液的制备为：取减压干燥至恒重的毛蕊异黄酮苷、芒柄花苷、毛蕊异黄酮、芒柄花素对照品，分别加入甲醇，制成每1mL分别含0.562mg毛蕊异黄酮苷、0.254mg芒柄花苷、0.357mg毛蕊异黄酮、0.274mg芒柄花素的对照品溶液。

5.根据权利要求1所述黄芪颗粒指纹图谱的测定方法，其特征在于：步骤（3）中分别精密吸取供试品溶液和对照品溶液各5-20μL。

6.根据权利要求5所述黄芪颗粒指纹图谱的测定方法，其特征在于：步骤（3）中分别精密吸取供试品溶液和对照品溶液各10μL。

7.根据权利要求2所述黄芪颗粒指纹图谱的测定方法，其特征在于：流动相梯度洗脱过程中，洗脱液的A、B相变化为：0～10min，A相2%-2%；10～15min，A相2%-3%；15～20min，A相3%-10%；20-25min，A相10%-15%；25-40min，A相15%-20%；40-45min，A相20%-30%；45-50min，A相30%-40%；50-60min，A相40%-56%；60-72min，A相56%-70%；72-80min，A相70%-90%；80-90min，A相90%-90%。

8.根据权利要求4所述黄芪颗粒指纹图谱的测定方法，其特征在于：配制好的对照品溶液储存在4℃的冰箱中备用。

9.如权利要求1～8中任一项所述黄芪颗粒指纹图谱的测定方法得到的黄芪颗粒特征指纹图谱。

10.根据权利要求9所述的黄芪颗粒特征指纹图谱，其特征在于：所述图谱中的共有峰为23个。