[发明专利]用于检测玉簪属植物病毒X的引物组及其应用有效
申请号: | 201310072636.2 | 申请日: | 2013-03-07 |
公开(公告)号: | CN103131799A | 公开(公告)日: | 2013-06-05 |
发明(设计)人: | 张永江;辛言言;魏梅生;马洁;朱水芳;李桂芬;李曼 | 申请(专利权)人: | 中国检验检疫科学研究院 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/68;C12N15/11 |
代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人: | 关畅 |
地址: | 100121 北*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 用于 检测 玉簪 植物 病毒 引物 及其 应用 | ||
1.检测玉簪属植物病毒X的环介导等温扩增引物组,为引物组A或引物组B;所述引物组A由引物1、引物2、引物3、引物4、引物5和引物6组成;所述引物组B由所述引物1、所述引物2、所述引物3和所述引物4组成;
所述引物1、所述引物2、所述引物3、所述引物4、所述引物5和所述引物6的核苷酸序列分别为序列表中的序列1、序列2、序列3、序列4、序列5和序列6。
2.根据权利要求1所述的引物组,其特征在于:所述引物组A中所述引物1、所述引物2、所述引物3、所述引物4、所述引物5和所述引物6的摩尔比为1:1:8:8:4:4;所述引物组B中所述引物1、所述引物2、所述引物3和所述引物4的摩尔比为1:1:8:8。
3.检测玉簪属植物病毒X的环介导等温扩增试剂或试剂盒,其特征在于:所述试剂或试剂盒含有权利要求1或2所述引物组。
4.根据权利要求3所述的试剂或试剂盒,其特征在于:所述试剂或试剂盒中还包括荧光显色剂。
5.根据权利要求4所述的试剂或试剂盒,其特征在于:所述荧光显色剂为钙黄绿素。
6.权利要求1或2所述引物组、或权利要求3-5中任一所述的试剂或试剂盒在鉴定或辅助鉴定待测样品中是否含有玉簪属植物病毒X中的应用。
7.鉴定或辅助鉴定待测样品中是否含有玉簪属植物病毒X的方法,为如下(A)或(B):
(A)包括如下(a1)和(a2)的步骤:
(a1)以从待测样品中提取的总RNA为模板,用权利要求1或2所述引物组、或权利要求3-5中任一所述的试剂或试剂盒进行逆转录环介导等温扩增;
(a2)根据步骤(a1)的扩增结果,按照如下方法确定所述待测样品中是否含有玉簪属植物病毒X:若所述待测样品反应液出现白色沉淀物,则所述待测样品中含有或候选含有玉簪属植物病毒X;反之,则所述待测样品不含或候选不含有玉簪属植物病毒X;
(B)包括如下(b1)和(b2)的步骤:
(b1)以从待测样品中提取的总RNA为模板,用权利要求5所述的试剂或试剂盒进行逆转录环介导等温扩增;
(b2)根据步骤(b1)的扩增结果,按照如下方法确定所述待测样品中是否含有玉簪属植物病毒X:若所述待测样品反应液为绿色,则所述待测样品中含有或候选含有玉簪属植物病毒X;若所述待测样品反应液为橙色,则所述待测样品中不含有或候选不含有玉簪属植物病毒X。
8.根据权利要求6所述的应用,或权利要求7所述的方法,其特征在于:所述待测样品为植物样品或微生物样品。
9.根据权利要求7或8所述的方法,其特征在于:所述逆转录环介导等温扩增反应为63℃条件下的恒温反应。
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