[发明专利]表达人血清白蛋白的质粒和重组菌以及它们的应用

权利要求书

1.一种重组质粒，包括表达盒甲和表达盒乙；

所述表达盒甲自上游至下游依次包括：序列表的序列3所示的AOX1启动子、人血清白蛋白的编码基因、序列表的序列4所示的CYC1翻译终止子；

所述表达盒乙自上游至下游依次包括：序列表的序列5所示的GAP启动子、所述人血清白蛋白的编码基因、序列表的序列6所示的AOX1翻译终止子；

所述人血清白蛋白为如下（1）或（2）：

（1）由序列表中序列11所示的氨基酸序列组成的蛋白质；

（2）将序列11的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能的由序列11衍生的蛋白质。

2.如权利要求1所述的重组质粒，其特征在于：所述人血清白蛋白的编码基因为如下1）或2）或3）或4）或5）的DNA分子：

1）编码区如序列表中序列2自5’末端第13至1842位核苷酸所示的DNA分子；

2）序列2自5’末端第7至1842位核苷酸所示的DNA分子；

3）序列表中序列2所示的DNA分子；

4）在严格条件下与1）或2）或3）限定的DNA序列杂交且编码具有相同功能的蛋白的DNA分子；

5）与1）或2）或3）限定的DNA序列具有90%以上同源性且编码具有相同功能的蛋白的DNA分子。

3.如权利要求1或2所述的重组质粒，其特征在于：所述重组质粒还包括DNA片段丙；所述DNA片段丙包括序列表的序列7所示的ADE2启动子和序列表的序列8所示的ADE2基因，且由所述ADE2启动子启动所述ADE2基因的表达。

4.将权利要求1至3中任一所述的重组质粒导入宿主菌得到的工程菌。

5.如权利要求4所述的工程菌，其特征在于：所述宿主菌为毕赤酵母。

6.如权利要求5所述的工程菌，其特征在于：所述毕赤酵母为PichiaPink^TM Strain1（ade2）。

7.权利要求4或5或6所述的工程菌在生产人血清白蛋白中的应用。