[发明专利]一种金钱菇三螺旋多糖的制备及其结构

说明书

技术领域

本发明涉及多糖的制备和结构鉴定领域，确切地说是一种金钱菇三螺旋多糖的制备及其结构。

背景技术

多糖是由单糖分子通过糖苷键连接而成的高分子化合物。多糖具有多种生物活性，例如，抗氧化、抗肿瘤、降血糖、抗菌等。同时多糖的生物活性与其化学结构和空间结构有着密切的联系，因此研究其结构能够为进一步研究其生物活性提供基础和前提。

金钱菇，是香菇的一种，因其外形像古时的金币，因此取名金钱菇。它含有多种化学成分，具有调节人体新陈代谢、帮助消化、降低血压、减少胆固醇、预防肝硬变、消除胆结石、防治佝偻病等功效。近年来，人们越来越关注金钱菇的药用价值，开始认识到金钱菇多糖的生物活性。目前，水提残渣直接被遗弃，没有得到很好地利用，而在水提残渣中还含有活性物质多糖，研究残渣中的活性多糖具有重要的意义。

发明内容

本发明的目的是在于提供一种从金钱菇三螺旋多糖的制备其结构表征方法，通过以下步骤实现：

一种金钱菇三螺旋多糖的制备，其特征在于包括以下步骤：

（1）    金钱菇水提残渣的制备：将金钱菇粉碎过60~100目筛，用乙醇脱色脱脂后，依次经过25 °C左右水提、90 °C左右水提后得到的残渣即为水提残渣；

（2）    多糖混合提取液的配制：配制5% NaOH与0.05% NaBH₄混合溶液；

（3）    提取过程：往水提残渣中加入料液比为1:30~1:40的多糖混合提取液，提取2~3 h，三层纱布过滤，提取两次，离心，合并提取液；

（4）    中和脱色：加入乙酸中和至中性后再用H₂O₂脱色；

（5）    透析：使用透析袋进行透析处理，然后通过旋转蒸发仪浓缩至原体积的1/3~1/5； 

（6）    离心：在浓缩液中加入丙酮，静置、离心，收集沉淀；

 (7)   多糖的获得：沉淀用蒸馏水溶解后进行透析、浓缩、冷冻干燥处理，得到多糖.

所述的一种金钱菇三螺旋多糖的制备，其特征在于步骤（4）中所用乙酸的浓度为5%，H₂O₂的浓度为30%，脱色温度为45~55 °C，脱色时间为1~2 h。

所述的一种金钱菇三螺旋多糖的制备，其特征在于步骤（5）中使用的透析袋的截留分子量为3500 Da，先用自来水流水透析3~5天，再改用蒸馏水透析3~5天。 

所述的一种金钱菇三螺旋多糖的制备，其特征在于步骤（6）中加入丙酮的量为浓缩液的1~1.5倍，静置时间为24~36 h，离心转速为8000~10000 r/min，离心时间为30~60 min。

所述的金钱菇三螺旋多糖的结构，其特征在于：

（1）三螺旋结构的确定：采用黏度测定实验和刚果红实验确定其螺旋结构；

（2）结构表征：用FT-IR、GC、NMR确定其一级结构。

所述的一种金钱菇三螺旋多糖的结构，其特征在于步骤（1）中刚果红实验中配置的多糖溶液浓度为2 mg/mL，刚果红溶液浓度为80 μmol/L和NaOH 溶液浓度范围为0.00~0.50 mol/L，梯度为0.05 mol/L，测量波长范围为200 nm~800 nm。

所述的一种金钱菇三螺旋多糖的结构，其特征在于步骤（2）中FT-IR的波长扫描范围为4000~400 cm^-1，采用KBr压片法测试；GC处理方法为糖醇乙酰酯法；NMR中的溶剂为DMSO-d₆。

本发明所提取的金钱菇三螺旋多糖为杂多糖，主要由葡萄糖组成，同时含有少量的甘露糖、半乳糖和木糖。糖链主链结构为β-(1→3)-D-葡聚糖，带有(1→6)连接支链。本发明具有如下优点：（1）本发明用的是水提金钱菇之后的残渣，可以持续利用，节省成本，扩展了金钱菇的应用领域；（2）本发明用碱提残渣中的多糖，扩宽了糖的范围，可以更加明确金钱菇的药用价值；（3）本发明对提取的多糖进行了结构鉴定，为更好地开发利用金钱菇多糖提供了重要的理论支撑。

附图说明

   图1为实施例刚果红实验结果；

   图 2 为实施例金钱菇碱提多糖的红外光谱；

图3为实施例金钱菇多糖的气相色谱图；

    图4为实施例金钱菇碱提多糖的核磁共振图。

具体实施方式

下面将进一步说明本发明的实质内容：