[发明专利]转基因大豆MON89788转化事件的检测方法和试剂盒无效
| 申请号： | 201310080635.2 | 申请日： | 2013-03-14 |
| 公开（公告）号： | CN103409498A | 公开（公告）日： | 2013-11-27 |
| 发明（设计）人： | 于常海;杨滨;张明;李飞武;刘乐庭 | 申请（专利权）人： | 海康生物科技(北京)有限公司;吉林省农业科学院 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 100176 北京市北京经济*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 转基因 大豆 mon89788 转化 事件 检测 方法 试剂盒 | ||
1.一种检测转基因大豆MON89788转化事件的方法，其包括以下步骤：
(a)将样品DNA95℃变性后立即冰置，使用特异性识别MON89788外源DNA区的特异引物对，在RNA聚合酶的作用下转录生成RNA；所述引物之一包含所述RNA聚合酶的识别序列；
(b)使用上述特异引物对，对上述所得RNA进行NASBA扩增，得RNA扩增产物；
(c)分别设计捕获探针和检测探针，对上述RNA扩增产物进行检测。
2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述RNA聚合酶为T7RNA聚合酶。
3.如权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述引物对分别包含SEQ ID No.3和SEQ ID No.4所示核苷酸序列。
4.如权利要求3所述的方法，其特征在于，所述引物对序列分别如SEQ ID No.5和SEQ ID No.6所示。
5.如权利要求4所述的方法，其特征在于，所述捕获探针包含SEQ ID No.7所示序列，所述检测探针包含SEQ IDNo.8所示序列。
6.一种检测转基因大豆MON89788转化事件的NASBA检测试剂盒，其特征在于，包括所构建的阳性质粒对照，包括特异性识别MON89788外源DNA区的引物对，RNA聚合酶，以及可特异性与上述引物对介导的NASBA扩增产物杂交的捕获探针和检测探针，所述引物之一包含所述RNA聚合酶的识别序列。
7.如权利要求6所述的试剂盒，其特征在于，所述引物对分别包含SEQ ID No.3和SEQ ID No.4所示核苷酸序列。
8.如权利要求7所述的试剂盒，其特征在于，所述引物对序列分别如SEQ IDNo.5和SEQ IDNo.6所示。
9.如权利要求8所述的试剂盒，其特征在于，所述捕获探针包含SEQ ID No.7所示核苷酸序列，所述检测探针包含SEQ ID No.8所示核苷酸序列。
10.如权利要求9所述的试剂盒，其特征在于，所述构建阳性质粒对照引物对包含SEQ IDNo.9SEQ IDNo.10和所示核苷酸序列。
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