[发明专利]乙型肝炎疫苗

说明书

技术领域

本发明涉及一种乙型肝炎疫苗。特别地，本发明涉及一种乙型肝炎疫苗，其包含乙肝表面抗原、乙肝核心抗原和具有免疫刺激活性的硫代寡聚脱氧核苷酸。

背景技术

乙型肝炎病毒(HBV)感染是世界范围的严重公共卫生问题之一。HBV感染是导致慢性乙型肝炎、肝硬化和肝细胞癌的重要原因(Fattovich G.J Hepatol 2008；48：335-352)。临床治疗慢性HBV感染的常用药物主要有核苷类似物和干扰素。核苷类似物无法完全清除肝细胞内的cccDNA，且长期使用易导致耐药突变株的出现以及停药后反弹(Kwon H，Lok AS.Nat Rev Gastroenterol Hepatol.2011；8：275-284.)。干扰素不适合用于无症状的HBV携带者，在慢性HBV患者中，使用半年后HBeAg血清学转换发生率仅33％，而且干扰素副作用较大也限制其应用(Tang SX，Yu GL.Lancet 1990；335(8684)：302)。

目前广泛应用的乙肝蛋白疫苗通过诱导体液免疫，产生保护性抗体，达到预防的目的。大量的研究发现保护性抗体仅能够消除胞外病毒颗粒，而清除胞内感染的病毒则主要依赖特异性的细胞免疫反应，辅助性T细胞、CD4⁺T细胞产生的IFN-γ等Th1型细胞因子，尤其是病毒特异性的杀伤性T淋巴细胞(cytotoxic T lymphocyte，CTL)来清除(Chin R，Lacamini S.Rev Med Viorl.2003：13(4)：255-72)。细胞免疫反应的强弱直接决定着乙肝的预后。因此，理想的治疗性乙肝疫苗需要同时诱导特异性的体液免疫和细胞免疫，突破乙肝的免疫耐受。

目前国内大多数乙肝治疗性疫苗的研发思路围绕着HBsAg，通过克服免疫耐受，产生抗HBsAg的抗体达到免疫清除的效果，如闻玉梅的HBsAg-免疫球蛋白复合物(Xu D Z，Zhao K，et al.PLoSONE，2008，3：e2565)，张宜俊的高剂量乙肝表面抗原疫苗(曾滢，张宜俊等，广东医学，2003年24卷07期，740-706页)等均采用此思路，从其最新的临床数据来看，这两个疫苗的治疗效果还不明朗。

研究表明，慢性乙肝感染患者的抗HBsAg的抗体亚型以IgG4为主，而乙肝感染治愈的患者的抗HBsAg的抗体亚型为IgG1≥IgG4，说明在乙肝感染的清除过程中Th1型抗体亚型IgG1发挥着重要的作用，评价Th1型抗体亚型是否高于或者等于Th2型抗体亚型可能提示乙肝治疗的效果(S.Rath，et al.Clin.exp.Immunol.(1988)72，164-167)。同时，乙肝感染患者的抗HBcAg抗体亚型为IgG1＞IgG3＞IgG4，而乙肝感染治愈的患者的抗HBcAg亚型发生转变，为IgG3＞IgG1＞IgG4，说明抗HBcAg特别是抗HBcAg的抗体亚型的转变可能与乙肝的治疗息息相关(Chien-Fu Huang，et al.Cellular & Molecular Immunology.2006；3(2)：97-106.)。

此外，还有研究表明，慢性乙肝病毒携带者和慢性乙肝患者的树突状细胞(pDC)表面受体TLR9表达下调，从而导致机体对乙肝表面抗原的免疫耐受，不能产生乙肝表面抗体或对乙肝表面抗原的细胞免疫(Q.Xie et al.Microbes and Infection 11(2009)515-523)。

专利US4547367利用HBcAg颗粒治疗/预防HBV感染和HBV介导的疾病，HBcAg颗粒免疫黑猩猩可保护黑猩猩免于感染HBV。而且HBcAg颗粒联合HBsAg颗粒免疫乙肝携带者母亲生产的新生儿，产生高滴度的抗HBsAg和抗HBcAg抗体，且在18个月的监测中均未见HBV感染。但是该专利并无明确提出抗HBcAg抗体亚型转变的证据，且无治疗HBV感染和HBV介导的疾病的直接证据。

专利WO2007/031334，保护了乙肝治疗性疫苗组分，其包含HBsAg、HBcAg和一种皂苷佐剂，而CpG-ODN可作为共用佐剂使用，但是，该乙肝治疗性疫苗在临床中需要联合核苷类似物进行联合治疗才能突破乙肝的免疫耐受，且e抗原转阴仅25％。

发明内容