[发明专利]电转染的方法及设备有效
申请号: | 201310086625.X | 申请日: | 2013-03-18 |
公开(公告)号: | CN103146750A | 公开(公告)日: | 2013-06-12 |
发明(设计)人: | 莫邦辉;马雨;王永生;魏于全 | 申请(专利权)人: | 四川大学 |
主分类号: | C12N15/85 | 分类号: | C12N15/85;C12N15/86;C12M1/42 |
代理公司: | 成都虹桥专利事务所(普通合伙) 51124 | 代理人: | 刘世平 |
地址: | 610065 四川*** | 国省代码: | 四川;51 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 转染 方法 设备 | ||
1.电转染的方法,其特征包括:对细胞进行四次放电,放电之间进行两次暂停:
第一次放电:电压为500~1500V的正向脉冲,持续时间20~60μs;
第一次暂停:暂停持续时间600~1200μs;
第二次放电:电压为500~1500V的负向脉冲,持续时间20~60μs;
第二次暂停:暂停持续时间600~1200μs;
第三次放电:电压为500~1500V的正向脉冲,持续时间10~50μs;
第四次放电:电压为100~300V的正向电泳电场,持续时间20~100ms。
2.如权利要求1所述的电转染的方法,其特征为:第一次放电的电压为800~1100V的正向脉冲,持续时间35~45μs。
3.如权利要求1所述的电转染的方法,其特征为:第一次暂停的暂停持续时间800~1000μs。
4.如权利要求1所述的电转染的方法,其特征为:第二次放电的电压为800~1100V的负向脉冲,持续时间35~45μs。
5.如权利要求1所述的电转染的方法,其特征为:第二次暂停的暂停持续时间800~1000μs。
6.如权利要求1所述的电转染的方法,其特征为:第三次放电的电压为800~1100V的正向脉冲,持续时间15~25μs。
7.如权利要求1所述的电转染的方法,其特征为:第四次放电的电压为150~200V的正向电泳电场,持续时间40~60ms。
8.如权利要求1至7之一所述的电转染的方法,其特征为:配合使用的电转染缓冲液组分为:PBS缓冲液,浓度30~200mM;Tris-HCl,浓度30~150mM;Ca(NO3)2,浓度0.2~1mM;KCl,浓度2~8mM;MgCl2,浓度10~20mM;NaCl,浓度50~150mM;葡萄糖,浓度5~30mM;pH为6.5~pH7.2。
9.如权利要求1至7之一所述的电转染的方法,其特征为:配合使用的电转染缓冲液组分为:PBS缓冲液,浓度30~200mM;Tris-HCl,浓度30~150mM;Ca(NO3)2,浓度0.2~1mM;KCl,浓度2~8mM;MgCl2,浓度10~20mM;NaCl,浓度50~150mM;pH为6.5~pH7.2。
10.用于权利要求1所述方法的电转染的设备,其特征为:包括顺序连接的显示电路、控制电路、逻辑电路和驱动电路,在驱动电路中通过导通元件将驱动电路与低压直流电源连接,驱动电路的输出端还通过全桥电路与高压直流电源连接,全桥电路的输出端连接负载,并通过电流检测电路连接所述的控制电路。
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