[发明专利]利用HVA1基因的半定量PCR法鉴定青稞抗旱性的方法无效
申请号: | 201310091325.0 | 申请日: | 2013-03-08 |
公开(公告)号: | CN103184284A | 公开(公告)日: | 2013-07-03 |
发明(设计)人: | 姚晓华;吴昆仑;蒋礼玲;王显萍;任又成 | 申请(专利权)人: | 青海省农林科学院 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 810016 *** | 国省代码: | 青海;63 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 利用 hva1 基因 定量 pcr 鉴定 青稞 抗旱性 方法 | ||
【权利要求书】:
1.一种利用HVA1基因的半定量PCR法鉴定青稞抗旱性的方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)青稞两叶期时开始用0-30%的PEG胁迫处理4天;
(2)采用上海生工总RNA提取试剂盒和逆转录试剂盒对叶片进行总RNA的提取及逆转录;
(3)以大麦肌动蛋白(β-Actin)基因为内参基因对目标基因HVA1的扩增;引物如下:
(4)采用Gel-pro软件对所得HVA1基因相对表达量图进行二次函数的拟合;
(5)根据拟合曲线计算HVA1基因的相对最高表达量或者对应的PEG浓度,其数值大者为抗旱性强的青稞品种。
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