[发明专利]一种体外人卵母细胞腔前卵泡培养方法无效
申请号: | 201310092117.2 | 申请日: | 2013-03-22 |
公开(公告)号: | CN103146643A | 公开(公告)日: | 2013-06-12 |
发明(设计)人: | 孔凡锋 | 申请(专利权)人: | 孔凡锋 |
主分类号: | C12N5/075 | 分类号: | C12N5/075 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 273500 山东省*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 体外 人卵母 细胞 卵泡 培养 方法 | ||
1.一种体外人卵母细胞腔前卵泡培养方法,其特征在于培养方法的具体步骤包括:
1)将放在含蔗糖和丙二醇的冷冻保护液中的并进行液氮低温贮存的体外人卵母细胞解冻后复苏培养。
2)将复苏培养获取的体外人卵母细胞分离提取后放入含有卵泡雌激素FSH的营养液中进行腔前培养。
2.根据权利要求1所述的体外人卵母细胞腔前卵泡培养方法,其特征在于在进行培养过程中加入一定量的曲古柳菌素A(TSA)。
3.根据权利要求1或2所述的体外人卵母细胞腔前卵泡培养方法,其特征在于步骤2)的具体方法是:配置营养液,在基本营养液Ham‘sF~10中加入青霉素110IU/ml,链霉素60μg/ml,并添加17%的脐带血清FCS,并加入浓度为2.3IU/ml的卵泡雌激素FSH;将获取的体外人卵母细胞在含17%的FCS的Ham‘sF~10清洗后移入营养液微滴中,微滴上覆矿物油,在37℃、5%CO2、饱和湿度的二氧化碳培养箱中进行培养,并每24小时换液一次。
4.根据权利要求1-3所述的体外人卵母细胞腔前卵泡培养方法,其特征在于加入的曲古柳菌素A(TSA)在营养液中的浓度为200μg/1。
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