[发明专利]一种沉默小鼠seps1基因的siRNA

权利要求书

1.一种沉默小鼠seps1基因的siRNA1，其特征在于，siRNA1其正义链序列为SEQ ID NO.1，反义链序列为SEQ ID NO.2。

2.一种干扰seps1表达的试剂盒，包括权利要求1所述的siRNA1。

3.根据权利要求2所述的试剂盒，还包括无关对照序列siRNA3，所述的无关对照序列siRNA3其正义链序列为SEQ ID NO.5，反义链序列为SEQ ID NO.6。

4.一种小鼠seps1基因沉默的方法，包括以下步骤：

1)siRNA的溶解：将权利要求1或2中任意一项所述的siRNA1的正反义链各4OD(132μg)，分别加入132μl RNase Free Water稀释溶解，并将权利要求3所述的对照序列siRNA3的正反义链各4OD(132μg)，分别加入132μl

无菌注射用水稀释溶解。

2)siRNA退火复合：将权利要求1或2中任意一项所述的siRNA1正反义链各4OD(132μg)等比例混合，同时将权利要求3中所述的对照序列siRNA3的正反义链等比例混合，100℃煮沸5min，逐渐自然冷却至室温，得到双链siRNA。

3)双链siRNA的脂质体包被：将上一步制备的双链siRNA分别与脂质体Lipofectamine 2000轻柔缓慢地混合均匀，使用比例为1μl Lipofectamine 2000：0.5μgRNA。

4)将上一步得到的siRNA1脂质体复合物和无关对照序列siRNA脂质体复合物分别加入生理盐水稀释，并将其分别注射到不同组实验小鼠体内，每只动物尾静脉注射10μgRNA，共0.3ml。

5.权利要求1所述的siRNA1或权利要求2-3中任意一项所述的试剂盒在制备沉默seps1基因药物中的应用。