[发明专利]一种制备奈西立肽的方法

权利要求书

1.一种制备奈西立肽的方法，包括： 

1)Fmoc-His(R1)-载体树脂； 

2)固相合成法制备线型奈西立肽树脂 

R3-X-Lys(Boc)-Met-Val-Gln(Trt)-Gly-Ser(tBu)-Gly-Cys(Trt)-Phe-Gly-Arg(Pbf)-Lys(Boc)-Met-Asp(tBu)-Arg(Pbf)-Ile-Ser(R2)-Ser(R2)-Ser(R2)-Ser(R2)-Gly-Leu-Gly-Cys(Trt)-Lys(Boc)-Val-Leu-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-His(R1)-载体树脂； 

3)线型奈西立肽树脂裂解得到线型奈西立肽；和 

4)将线型奈西立肽氧化得到奈西立肽； 

其中Fmoc为9-芴甲氧羰基，与氨基相连或与羧基所连的碳原子上的氮原子相连。 

2.权利要求1的方法，还包括纯化奈西立肽的步骤，纯化优选通过重结晶方法或HPLC(例如反相HPLC)而进行。 

3.权利要求1的方法，其中步骤1)-2)在固相反应柱中进行；且其中步骤1)的反应温度在-30℃至0℃，优选-30℃至-20℃，步骤2)-4)均在室温和常压下进行；所述树脂载体为2-CTC树脂或王树脂，优选2-CTC树脂；所述树脂的替代度为0.2-1.2mmol/g，优选为0.5-1.1mmol/g，更优选为0.6-1.0mmol/g。 

4.权利要求1的方法，其中步骤1)-2)中的偶联剂为HOBt/DIC、HBTU/HOBt/DIPEA、HATU/HOAt/DIPEA、PyAOP/HOAt/DIPEA、PyBOP/HOBt/DIPE；步骤1)-2)中偶联反应的时间通常为1-6小时，优选2-5小时。 

5.权利要求1的方法，其中R1为Trt或π-MBom；优选地，R2彼此独立地为Trt或mmt；优选地，X为Ser(tBu)-Pro；优选地，R3为Fmoc、Boc或H。 

6.权利要求1的方法，其中步骤2)中脱除Fmoc的试剂为DBLK；脱保护反应时间通常为5-30分钟，优选10-20分钟。 

7.权利要求1的方法，其中步骤3)中的裂解液为TFA、苯酚、苯甲硫醚、乙二硫醇、水混合溶剂，混合溶剂的配比为：TFA体积比为80-85％，苯酚的体积比1-5％、苯甲硫醚的体积比1-5％、乙二硫醇的 体积比1-5％、水的体积比1-5％。 

8.权利要求1的方法，其中步骤1)-2)中的溶剂为DMF、DCM或其混合物，其中二者体积比优选为1∶1；步骤4)中的溶剂为水和乙腈的混合液或是水和甲醇的混合液，优选水和乙腈的体积比1∶1的混合液。 

9.权利要求1的方法，其中步骤4)中氧化剂为氧气或双氧水。 

10.权利要求1的方法，其中步骤1)中在氨基酸Fmoc-His(R1)-OH偶联至载体树脂上之后，还包括向其中加入一种封闭液除去树脂中过量的未反应基团的步骤；当所述载体树脂为2-CTC树脂时，所加入的封闭液优选为体积比DIPEA∶甲醇∶DCM＝1∶2∶17的混合液；当所述载体树脂为王树脂时，所加入的封闭液优选为摩尔比为1∶1的醋酐和吡啶；步骤1)制得的Fmoc-His(R1)-载体树脂的替代度可为0.1-0.4mmol/g；优选0.13-0.35mmol/g。