[发明专利]一株伯克霍尔德氏菌及利用该菌发酵合成PHA的方法

权利要求书

1.一株聚羟基脂肪酸酯合成菌伯克霍尔德氏菌(Burkholderia sp.)CG-01，CGMCCNo.7329。

2.利用伯克霍尔德氏菌(Burkholderia sp.)CG-01，CGMCC No.7329发酵合成聚羟基脂肪酸酯的方法，其特征在于包括如下步骤：将菌种接种到5ml种子培养基，30℃下摇床振荡培养，转速120rpm；培养11-13小时后，按照5％的接种量接种到200ml发酵合成培养基中，30℃摇床振荡培养，转速150rpm；培养24小时后，菌液离心，磷酸缓冲溶液洗涤，再离心，离心后的菌体全部转入200ml PHA发酵合成培养基中，转速120-180rpm，30℃下摇瓶发酵36-72小时；离心发酵液，弃上清，收集菌体冷冻干燥；将干燥菌体转入100ml三角瓶中，按25ml/g的量加入氯仿充分搅拌48小时，过滤去除菌体残渣，将滤液旋转蒸发浓缩后，加入浓缩后剩余物40倍体积的冷甲醇沉淀PHA产物过夜，收集沉淀，真空干燥，保存，称重。

3.根据权利要求2所述的利用伯克霍尔德氏菌Burkholderia sp.CG-01，CGMCC No.7329发酵合成聚羟基脂肪酸酯的方法，其特征在于所用的培养基配方如下：

(1)种子培养基

蒸馏水1000ml，酵母浸出粉10g，蛋白胨10g，牛肉浸出粉5g，(NH₄)₂SO₄5g，调节pH7.2；

(2)发酵合成培养基

蒸馏水1000ml，Na₂HPO₄3.8g，KH₂PO₄2.65g，MgSO₄0.2g或MgSO₄7H₂O0.411g，NH₄Cl0.36g，葡萄糖10-20g，微量元素1ml；微量元素成分为：0.1mol/L HCl1000ml，CoCl₂·6H₂O0.218g，CaCl₂7.8g，CrCl₃·6H₂O0.105g，NiCl₂·6H₂O0.118g，CuSO₄·5H₂O0.156g，FeCl₃9.7g；滤菌膜过滤除菌，调pH至7.0。