[发明专利]一种合成替度鲁肽的方法

权利要求书

1.一种合成替度鲁肽的方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤1、固相合成在SEQ ID NO:1所示氨基酸序列N端、Asp侧链上、Ser侧链上、Glu侧链上、Asn侧链上、Thr侧链上、Arg侧链上、Gln侧链上、Trp侧链上和Lys侧链上偶联有保护基且在C端偶联有树脂的多肽片段树脂；

步骤2、所述多肽片段树脂脱N端保护基，与N端偶联有X保护基且侧链上偶联有Y保护基的His或N端偶联有X保护基且侧链上偶联有Y保护基的His盐在双试剂偶联体系和有机碱的作用下进行偶联反应，得到替度鲁肽树脂；

其中，所述X保护基为Boc保护基或Trt保护基，所述Y保护基为Bum保护基、Boc保护基、mtt保护基或者mmt保护基；所述双试剂偶联体系由A试剂和B试剂组成，A试剂选自HBTU、HATU、PyBOP、PyAOP中的一种，B试剂选自HOAt、HOBt中的一种，所述有机碱为DIPEA或TMP；

步骤3、将替度鲁肽树脂脱除N端X保护基后裂解，获得替度鲁肽粗品，经RP-HPLC纯化后获得替度鲁肽纯品。

2.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述树脂为CTC树脂或者Wang树脂。

3.根据权利要求1所述方法，其特征在于，步骤1具体为：

步骤1.1、Fmoc-Asp(OtBu)-OH在HOBt/DMAP/DIC三试剂偶联体系或者有机碱DIPEA作用下与树脂进行偶联反应得到Fmoc-Asp(OtBu)-树脂；

步骤1.2、Fmoc-Asp(OtBu)-树脂脱除Fmoc保护基得到H-Asp(OtBu)-树脂，Fmoc-Thr(tBu)-OH在HOBt/DIC双试剂偶联体系作用下与H-Asp(OtBu)-树脂进行偶联反应得到Fmoc-Thr(tBu)-Asp(OtBu)-树脂；

步骤1.3、按照SEQ ID NO:1所示氨基酸序列C端到N端的顺序，依次逐个将Fmoc-Ile-OH、Fmoc-Lys(Boc)-OH、Fmoc-Thr(tBu)-OH、Fmoc-Gln(Trt)-OH、Fmoc-Ile-OH、Fmoc-Leu-OH、Fmoc-Trp(Boc)-OH、Fmoc-Asn(Trt)-OH、Fmoc-Ile-OH、Fmoc-Phe-OH、Fmoc-Asp(OtBu)-OH、Fmoc-Arg(pdf)-OH、Fmoc-Ala-OH、Fmoc-Ala-OH、Fmoc-Leu-OH、Fmoc-Asn(Trt)-OH、Fmoc-Asp(OtBu)-OH、Fmoc-Leu-OH、Fmoc-Ile-OH、Fmoc-Thr(tBu)-OH、Fmoc-Asn(Trt)-OH、Fmoc-Met-OH、Fmoc-Glu(OtBu)-OH、Fmoc-Asp(OtBu)-OH、Fmoc-Ser(tBu)-OH、Fmoc-Phe-OH、Fmoc-Ser(tBu)-OH、Fmoc-Gly-OH、Fmoc-Asp(OtBu)-OH和Fmoc-Gly-OH按照步骤1.2偶联方式进行氨基酸延伸偶联，得到Gly-Asp(OtBu)-Gly-Ser(tBu)-Phe-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Glu(OtBu)-Met-Asn(Trt)-Thr(tBu)-Ile-Leu-Asp(OtBu)-Asn(Trt)-Leu-Ala-Ala-Arg(pbf)-Asp(OtBu)-Phe-Ile-Asn(Trt)-Trp(Boc)-Leu-Ile-Gln(Trt)-Thr-Lys(Boc)-Ile-Thr(tBu)-Asp(OtBu)-树脂，即多肽片段树脂；

其中，所述Fmoc为氨基酸N端保护基，所述OtBu、tBu、Trt、Boc、pbf为氨基酸侧链保护基。

4.根据权利要求3所述方法，其特征在于，步骤1.1所述Fmoc-Asp(OtBu)-OH、HOBt、DMAP、DIC的摩尔比为1:1.2:0.1:1.2。

5.根据权利要求3所述方法，其特征在于，步骤1.1所述Fmoc-Asp(OtBu)-OH和DIPEA的摩尔比为1:3。

6.根据权利要求3所述方法，其特征在于，步骤1.2和1.3所述各氨基酸与HOBt、DIC的摩尔比为1:1.2:1.2。