[发明专利]调节SIRPα-CD47相互作用以增加造血干细胞植入和用于此的化合物

说明书

本申请是申请日为2008年10月10日的题为“调节SIRPα-CD47相互作用以增加造血干细胞植入以及用于此的化合物”的中国专利申请No.200880119787.6的分案申请。 

技术领域

本发明涉及调节SIRPα-CD47相互作用以增加造血干细胞植入以及用于此的化合物。在某些实施方式中，提供分离的SIRPα和CD47多肽、片段及融合蛋白，用于增强造血干细胞植入。此外，还提供通过给予上述多肽而增加造血干细胞植入的方法。 

背景技术

从骨髓(BM)或G-CSF动员的外周血(PB)中移植人造血干细胞(HSC)已经成为干细胞生物中最重要的临床应用之一。在患肿瘤性疾病的个体内进行HSC移植使得可能应用高剂量化疗方案及随后的HSC复苏来克服由于化疗导致的造血失败，提高血液和非血液肿瘤的治愈率。此外，遗传疾病如地中海贫血和某些免疫缺陷可通过基因修正HSC的自体移植或通过同种异体HSC移植而治疗。一个使HSC移植成功的关键发现是将人白细胞抗原(HLA)系统确定为人主要组织相容性复合物。尽管供者与宿主之间的HLA不匹配在移植排斥中起主要作用，但移植失败甚至常常发生在接受未经处理但HLA一致的移植物的患者身上(Thomas，E.D.et al.(1997)Blood 49，511-33；Storb，R.et al.(1977)N Engl J Med 296，61-6)。该情形中，移植排斥部分与次要组织相容性抗原的不匹配相关(Gale，R.P.et al.(1981)Blood 57，9-12)。除HLA单倍体之外，尚未表征其他调节HSC移植的基因。 

HSC定位于由成纤维细胞间质、成骨细胞、破骨细胞、巨噬细胞和内皮细胞构成的支持性微环境壁龛中(Suda，T.et al.(2005)Trends Immunol 26，426-33)。去除HSC与这种壁龛的相互作用，例如通过封闭特异性粘附蛋白或趋化因子受体，则阻止HSC植入 (Lapidot，T.et al.(2005)Blood 106，1901-10)。此外，自然杀伤(NK)细胞和巨噬细胞，为免疫系统的两种固有组分，已证实可分别在鼠类HSC移植(Murphy，W.J.et al.(1987)J Exp Med 165，1212-7)和人造血干细胞异种移植(McKenzie，J.L.et al.(2005)Blood 106，1259-61)中发挥作用。对移植后造血干细胞植入机制的深入理解，包括控制调节性通路的基因，可最终转化成较好的临床结局。 

非肥胖性糖尿病/重症联合免疫缺陷NOD.Prdck^sc/sc(NOD.SCID)小鼠中的异种移植已经成为人HSC移植的“金标准”试验。该检测基于人HSC在静脉内注射后再植这些动物的免疫系统的能力(Hematopoiesis-A Development Approach(ed.Zon，L.I.)99-118(Oxford University Press，New York，USA，2001)中的Wang，J.C.Y.et al.“Normal and leukemic human stem cells assayed in immune-deficient mice”)。启动人异种移植的细胞可操作性定义为SCID小鼠再植细胞(SRC)，拥有属于HSC的属性，且不同于体外分析的较成熟的祖细胞。该系统已使在人HSC区室内进行增殖、分化和自我更新属性的分析成为可能。 

信号调节蛋白(SIRP)包括细胞表面糖蛋白家族，其在骨髓(包括巨噬细胞、粒细胞、髓系树突状细胞和肥大细胞)和神经细胞(在Barclay，A.N.& Brown，M.H.，Nat Rev Immunol 6，457-64(2006)总结了；另参见WO 97/48723)上表达。SIRP构成一个种类多样的多基因免疫受体家族，涵盖抑制性(SIRPα)、激动性(SIRPβ)、非信号性(SIRPγ)和可溶性(SIRPδ)成员。CD47是一种广泛表达的跨膜糖蛋白，作为SIRPα的细胞配体发挥作用，结合SIRPα的胞外NH₂末端。关于SIRPα在宿主细胞被巨噬细胞所吞噬过程中的抑制性作用，已有清楚的记载。然而，较近期的研究结果还证实了通过SIRPα结合介导的其他正向信号传导作用(Shultz，L.D.et al.(1995)J Immunol 154，180-91)。