[发明专利]一种高效液相色谱在线分析方法及应用

权利要求书

1.一种高效液相色谱在线分析方法，其特征在于，通过以下步骤实现：

（1）设计高效液相在线分析系统，该系统主要由样品预处理系统（1）、高效液相色谱仪（2）、远程电脑（3）、可编程逻辑控制器（4）及触摸屏（5）、交换机（6）构成，样品预处理系统（1）与高效液相色谱仪（2）内的六通阀（24）相连，高效液相色谱仪（2）和触摸屏（5）通过交换机（6）与远程电脑（3）相连，可编程逻辑控制器（4）和触摸屏（5）通过网线（7）连接，样品预处理系统（1）由清洗罐（8）、两通电磁阀（9）、清洗罐三通电磁阀（10）、回收三通电磁阀（16）、进液比例电磁阀（13）、回收比例电磁阀（17）、进液流量变送器（14）、回收流量电磁阀（18）、初滤过滤器（11）、精密过滤器（15）、单向阀（19）、进液口（20）、出液口（21）、液相回收口（22）和预处理系统回收口（23）组成，进液口（20）通过两通电磁阀（9）连接清洗罐三通电磁阀（10），清洗罐三通电磁阀（10）的一个通路连接清洗罐（8），另一个通路连接初滤过滤器（11），初滤过滤器（11）连接蠕动泵（12），蠕动泵（12）的一条支路通过进液比例电磁阀（13）串连接流量变送器（14）、精密过滤器（15）和回收三通电磁阀（16），回收三通电磁阀（16）另外两个支路分别连接单向阀（19）及出液口（21），单向阀（19）的一个支路连接预处理系统回收口（23），另一支路连接比例电磁阀（17）及流量变送器（18），在单向阀（19）与回收三通电磁阀（16）之间连接液相回收口（22），样品预处理系统的出液口（21）连接六通阀（24）的e端口，液相回收口（22）连接六通阀（24）的f端口，远程电脑（3）上安装色谱工作站和液相数据管理软件；

（2）将在线样品管线连接样品预处理系统（1）的进液口（20），打开高效液相色谱仪（2）并使用相应流动相平衡系统，选择进样方式为进样器程序，设置进样器程序：阀旁路——等待0.2 min——进样；选择序列进样，设置序列和序列参数；

（3）当高效液相色谱仪流动相平衡30 min后压力达到平衡时打开样品预处理系统电源，点击触摸屏（5）进入控制界面，进行运行、清洗和停止预处理，通过样品预处理系统（1）预处理后的样品经蠕动泵（12）由出液口（21）连接六通阀（24）的（e）端口，此时六通阀（24）处于取样状态，预处理后的样品连续经过定量环（g），多余样品经（f）端口排出回收；

（4）预处理系统（1）运行10 min达到稳定后在液相色谱仪（2）上开始进样，此时高效液相色谱（2）按照进样器程序进样分析，六通阀（24）切换至进样状态，高效液相色谱的泵将流动相连同定量环（g）中样品泵入色谱柱进行分析，而预处理系统处理后的样品从六通阀（f）端口直接连接样品预处理系统液相回收口（22）进行回收；

（5）在开始液相进样分析时打开液相数据管理软件并设置液相数据保存的文件位置及相应色谱参数，启动液相数据管理软件，色谱参数设置包括所需色谱峰的保留时间，采集范围及采集周期，其中，采集范围设置为30 秒，根据所需分析的不同样品性质差异作调整；采集周期设置为20 秒，软件启动后即可实时读取液相分析结果并做相应处理，然后将处理后结果传输至远程电脑（3）上并显示分析结果及含量曲线，该结果还可同步至触摸屏上实时显示； 

（6）当高效液相色谱序列分析结束时，在触摸屏（5）控制界面点击“停止”以停止运行样品预处理系统，关闭液相数据管理系统软件。

2.根据权利要求1所述的一种高效液相色谱在线分析方法，其特征在于，六通阀（24）的（a）端口和（d）端口连接定量环（g），（b）端口连接高效液相色谱的泵，（c）端口连接色谱柱，（f）为废液端口，连接液相回收口（22）。

3.根据权利要求1所述的一种高效液相色谱在线分析方法，其特征在于，步骤（5）中分析结果除可以实时显示外还可在远程电脑（3）上通过液相数据管理软件按照时间查询历史结果。

4.根据权利要求1所述的一种高效液相色谱在线分析方法，其特征在于，步骤（6）后，分析结束后预处理系统需要清洗，点击触摸屏控制界面上“清洗”按钮进行系统自动清洗，此时，清洗罐三通电磁阀（10）切换至清洗罐，回收三通电磁阀（16）切换至废液通路。

5.根据权利要求1所述的一种高效液相在线分析方法在中药生产过程中在线分析中的应用，其特征在于，在中药生产过程中有效成分含量或比例的在线分析中的应用。