[发明专利]新型多肽、水解抗菌肽及其制备方法

权利要求书

1.编码新型多肽的核苷酸序列，其特征在于，如SEQ ID NO：1所示。

2.含有权利要求1所述的核苷酸序列的重组载体。

3.根据权利要求2所述的重组载体，其特征在于，在所述核苷酸序列的5’端引入BamHI位点，且在3’端引入XhoI位点，BamHI和XhoI位点酶切后得酶切片段，同时对pGEX-4T-1上述位点进行酶切后，连接所述酶切片段和酶切后的pGEX-4T-1连接，得重组载体。

4.权利要求2所述重组载体制备的重组菌株。

5.权利要求1所述的核苷酸序列编码的新型多肽，其特征在于，其氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示。

6.权利要求5所述的新型多肽的制备方法，其特征在于，具体包括以下步骤：

A新型多肽基因的合成及表达载体构建

将如SEQ ID NO：1所示的核苷酸序列的编码序列5’和3’端引入BamHI和XhoI酶切位点，与pGEX-4T-1分别进行酶切后再连接构建重组质粒，并转化到BL21，构建重组菌株；

B诱导表达

步骤A所得重组菌株单菌落扩大培养，加入IPTG诱导后，37℃、180r/m振摇培养5h，4℃、12000r/m离心10min收集菌体，按每100ml培养液加入20ml PBS重悬沉淀，得新型多肽。

7.根据权利要求6所述的新型多肽的制备方法，其特征在于：步骤A所得重组菌株抗性培养至富集后，收集菌体，所述菌体中含有所述新型多肽。

8.权利要求5所述的新型多肽的制剂，其特征在于，所述制剂为水解后的所述新型多肽，即水解抗菌肽。

9.权利要求8所述的制剂的制备方法，其特征在于，在所述抗菌肽中调节pH值至1.5-2.0，加入胃蛋白酶至充分水解，并调节pH至中性，离心后收集上清液；上清液经微滤、喷雾干燥或冻干，即为水解抗菌肽。