[发明专利]一种利用单双链复合体解析真菌菌群结构的方法有效
申请号: | 201310110305.3 | 申请日: | 2013-04-01 |
公开(公告)号: | CN103276056A | 公开(公告)日: | 2013-09-04 |
发明(设计)人: | 倪莉;黄志清;吕晓丹 | 申请(专利权)人: | 福州大学 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12Q1/04 |
代理公司: | 福州元创专利商标代理有限公司 35100 | 代理人: | 蔡学俊 |
地址: | 350108 福建省福州市*** | 国省代码: | 福建;35 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 利用 单双链 复合体 解析 真菌 结构 方法 | ||
1.一种利用单双链复合体解析真菌菌群结构的方法,其特征在于:所述方法的步骤如下:提取样品中微生物总基因组DNA;基于18S rDNA片段构建单双链复合体并进行DGGE或TGGE分析;割胶回收单双链复合体并将其扩增为完整双链;对扩增到的完整双链进行测序并将测定的序列提交到NCBI上利用Blast在GeneBank数据库中进行相似性搜索;最后根据相似性得分判断对应真菌的种属。
2.根据权利要求1所述的利用单双链复合体解析真菌菌群结构的方法,其特征在于:所述单双链复合体的制备步骤为:首先用磷酸化的引物扩增出大于1000bp的18S rDNA长双链片段;其次用Lambda核酸外切酶处理长双链片段,得到未被磷酸化的单链;最后以该单链为模板,采用单个引物进行一步延伸得到单双链复合体。
3.根据权利要求1所述的利用单双链复合体解析真菌菌群结构的方法,其特征在于:用于DGGE 或TGGE分析时,单双链复合体的双链区不超过500bp。
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