[发明专利]一种脑蛋白水解物的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种脑蛋白水解物的制备方法。

背景技术

脑蛋白水解物是一种由动物脑组织经蛋白酶水解后得到的富含多种氨基酸和小分子多肽的一种混合物，由于含有大量人脑必须的氨基酸和多种神经生长的活性肽，可以调节和改进神经元的代谢，临床上，脑蛋白水解物主要用于治疗颅脑损伤和脑血管病(如脑梗和脑出血等)后遗症的恢复治疗，加速脑部神经系统的功能恢复。

由于动物脑组织含有大量脂肪物质，所以现行的的脑蛋白水解物的制备方法主要有两种前期处理工艺，一种是将脑组织匀浆液用丙酮法经多次提取去掉脂肪类物质，然后再用蛋白酶进行酶解，再经进一步加工得到脑蛋白水解物，这种工艺的主要缺点就是，在处理过程中使用大量的丙酮等有机物，而丙酮等有机物有一定毒性，对人的粘膜和神经系统都有一定损害，制备过程中的废液和挥发到空气中的有机物对水源和空气也会造成一定的污染，具有环保方面的潜在危害，如国内公开的专利CN1110915A等；另一种工艺就是不用丙酮法去掉脑组织匀浆液中的脂肪类物质，而是直接将脑组织匀浆液进行蛋白酶水解，并通过进一步加工得到脑蛋白水解物，这种工艺的缺点就是，在脑组织匀浆液中含有大量脂肪，影响蛋白酶的水解效果，制备效率低，同时，较多的脂肪类物质会混在最后的脑蛋白水解物中，影响最终药品的外观和稳定性，如国内公开的专利CN1228082C、CN1129451C等。

发明内容

本发明是要解决现有方法的制备效率低及在制备过程中使用有机物从而对人和环境产生危害的问题，提供了一种脑蛋白水解物的制备方式。

本发明一种脑蛋白水解物的制备方法，是通过以下步骤进行的：一、脑组织匀浆：取猪脑组织，去除筋膜和血管，用纯化水冲洗，然后加入3倍质量的纯化水，在匀浆机中匀浆5～15min，采用超声波破碎机以超声频率为25000Hz超声处理15min，得到脑组织匀浆液；二、脱脂：将步骤一的脑组织匀浆液，用质量百分含量为10％的盐酸调节pH值为5.0～5.5，然后在0～10℃的条件下静止4～6h，然后用乳脂分离机分离，去掉混浊液，收集清液，按收集清液总重量的0.5-1.0％向清液中加入药用硅藻土，搅拌30min，再用板框过滤器过滤，去掉硅藻土，得到脱脂脑组织匀浆液；三、酶解：将步骤二得到的脱脂脑组织匀浆液，用质量百分含量为10％的盐酸调pH值为1.8-2.0，按照步骤一猪脑组织的总重量的2％-3％加入胃蛋白酶，在40～42℃的温度下水解4～6h，然后用质量百分含量为10％的氢氧化钠调节pH值为7.0～8.0，再按照步骤一脑组织的总重量的1％-1.5％加入胰蛋白酶，在40～42℃的温度水解4-6h，得到混合液体，然后水浴加热至80-82℃，并保温15min后，再通过水浴降温至20-25℃，按混合液体重量比为1％的比例加入药用级硅藻土，搅拌15min后用板框过滤器过滤，收集滤过液，得到酶解液；四、超滤：将步骤三得到的酶解液，用质量百分含量为10％的盐酸调节pH值为6.0～7.0，依次用截留分子量为10000道尔顿和5000道尔顿的超滤器进行超滤，收集分子量小于5000道尔顿的液体，得到超滤液；五、纳滤，将步骤四得到的超滤液用截留分子量为90～150道尔顿的纳滤机进行纳滤浓缩，直至浓缩液中的含氮量大于6mg/ml，停止浓缩，即得到脑蛋白水解物。

本发明使用纯机械的物理方法来去除脑组织中的脂肪类物质，而不使用有机溶剂法，是一种非常环保的方法，同时没有有机物在脑蛋白水解物中的残留，也更安全，采用两次硅藻土吸附，去除脑蛋白水解物中的残余脂肪物质，进一步改善了药物的稳定性。

附图说明

图1为试验1制备的脑蛋白水解物溶液的色谱图；

图2为试验1对照的脑蛋白水解物的标准色谱图。

具体实施方式