[发明专利]一种大豆疫霉菌无毒基因Avr1c的特异性检测方法无效
申请号: | 201310113565.6 | 申请日: | 2013-04-03 |
公开(公告)号: | CN103160593A | 公开(公告)日: | 2013-06-19 |
发明(设计)人: | 文景芝;杨明秀;孙龙 | 申请(专利权)人: | 东北农业大学 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12Q1/04;C12N15/11 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 150030 黑龙*** | 国省代码: | 黑龙江;23 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 大豆 霉菌 无毒 基因 avr1c 特异性 检测 方法 | ||
1.一种用于大豆疫霉菌无毒基因Avr1c检测的引物,是由序列表中序列1和序列2的核苷酸序列组成的一对引物。
2.检测大豆疫霉菌无毒基因Avr1c的方法,是以大豆疫霉菌基因组DNA为模板,用由序列表中序列1和序列2的核苷酸序列组成的一对引物进行PCR扩增,如扩增产物中具有616 bp的条带,则表明该待测物中含有大豆疫霉菌无毒基因Avr1c。
3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于:所述的20.0 μl PCR反应体系中,含待测物的基因组DNA模板 100 ng,10 pmol/μl的引物F 1.0 μl,10 pmol/μl的引物R 1.0 μl,10 pmol/μl 的dNTP 0.3 μl,10×PCR缓冲液 2.5 μl,25 mM的MgCl2 1.8 μl,TaqDNA聚合酶0.2 μl,以灭菌去离子水补足至20.0 μl。
4.根据权利要求2所述的方法,其特征在于:所述PCR反应条件为:先94℃ 3 min;随后94℃ 30 sec,56℃ 30 sec,72℃ 60 sec,共40个循环;再72℃ 10 min。
5.根据权利要求2所述的方法,其特征在于:检测扩增产物是进行1.0%琼脂糖凝胶电泳。
6.根据权利要求2~5任一所述的方法,其特征在于:所述待测物为大豆疫霉菌。
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