[发明专利]杂交瘤细胞株1H2、其产生的抗赭曲霉毒素A单克隆抗体及其应用

权利要求书

1.杂交瘤细胞株1H2，其特征在于：它保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO.C201329。

2.抗赭曲霉毒素A单克隆抗体，其特征在于：它由保藏编号为CCTCC NO.C201329的杂交瘤细胞株1H2分泌产生。

3.权利要求2所述的抗赭曲霉毒素A单克隆抗体在赭曲霉毒素A含量测定中的应用。

4.根据权利要求2所述的抗赭曲霉毒素A单克隆抗体的制备方法，其特征在于：将权利要求1所述的杂交瘤细胞株1H2注射预先用福氏不完全佐剂处理过的BALB/c小鼠，收集该小鼠的腹水，纯化即得抗赭曲霉毒素A单克隆抗体。

5.根据权利要求4所述的抗赭曲霉毒素A单克隆抗体的制备方法，其特征在于：所述的纯化方法为辛酸-硫酸铵法，具体步骤为：用双层滤纸过滤小鼠腹水，4℃，12000r/min离心15min以上，吸取上清，将所得腹水上清与4倍体积的醋酸盐缓冲液混合，搅拌下缓慢加入正辛酸，每毫升腹水所需的正辛酸体积为30～35μL，室温混合30～60min，4℃静置2h以上，然后4℃，12000r/min离心30min以上，弃沉淀，将得到的上清液用双层滤纸过滤后，加入1/10滤液体积的摩尔浓度为0.1mol/L和pH值为7.4的磷酸盐缓冲液，用2mol/L的氢氧化钠溶液调节该混合液的pH值至7.4，4℃预冷，缓慢加入硫酸铵至硫酸铵终浓度为0.277g/mL，4℃静置2h以上，然后4℃，12000r/min离心30min以上，弃上清，将所得沉淀用原腹水体积1/10的0.01mol/L、pH值为7.4的磷酸盐缓冲液重悬，装入透析袋，用纯水透析，将充分透析好的蛋白溶液置-70℃冰箱冷冻，之后用冷冻干燥机冻干，收集冻干粉，即得纯化好的抗赭曲霉毒素A单克隆抗体，将抗体置-20℃冰箱中备用；

所述的醋酸盐缓冲液为0.29g醋酸钠，0.141mL醋酸加水定容到100mL所得；所述的0.01mol/L的磷酸盐缓冲液为0.8g氯化钠，0.29g十二水磷酸氢二钠，0.02g氯化钾，磷酸二氢钾0.02g，加水定容到100mL所得；所述的0.1mol/L的磷酸盐缓冲液为8g氯化钠，2.9g十二水磷酸氢二钠，0.2g氯化钾，磷酸二氢钾0.2g，加水定容到100mL所得。