[发明专利]发酵法生产α-酮戊二酸的残糖控制方法无效
申请号: | 201310120209.7 | 申请日: | 2013-04-09 |
公开(公告)号: | CN103194496A | 公开(公告)日: | 2013-07-10 |
发明(设计)人: | 陈宁;吴瑞方;冯甲;徐庆阳;谢希贤;刘淑云 | 申请(专利权)人: | 天津科技大学 |
主分类号: | C12P7/50 | 分类号: | C12P7/50;C12R1/15 |
代理公司: | 天津佳盟知识产权代理有限公司 12002 | 代理人: | 侯力 |
地址: | 300457 天津市塘*** | 国省代码: | 天津;12 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 发酵 生产 酮戊二酸 控制 方法 | ||
1.一种发酵法生产α-酮戊二酸的残糖控制方法,其特征在于:以谷氨酸棒状杆菌(Corynebacterium glutamicum)GKG-047为生产菌株,发酵生产α-酮戊二酸,发酵时间35~40h,初始发酵发酵时,发酵液中底糖浓度为7%~9%,发酵过程中,控制发酵液中残糖浓度维持在3%~2%,发酵后期,即发酵30至发酵结束,发酵液中残糖应该严格高于1%。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于该方法的具体操作如下,以谷氨酸棒状杆菌为出发菌株,接种至活化斜面,32℃培养12~14h后,用接种环刮取斜面菌种接种至种子培养基,32℃,200rpm培养7~8h;按10%的接种量转接至含底糖为7%~9%的发酵培养基的发酵罐中,34℃,开始发酵;以后每两个小时取样,检测发酵液的残糖浓度,通过流加90%~70%的口服葡萄糖溶液,使得发酵液中残糖浓度维持在3%~2%,发酵后期,即发酵30至发酵结束,发酵液中残糖应该严格高于1%。
3.根据权利要求2所述方法,其特征是:
⑴斜面培养基成分以g/L计为:蛋白胨10,酵母粉5,NaCl2.5,琼脂30,pH7.0~7.2;
⑵种子培养基成分:口服葡萄糖25g/L,玉米浆45mL/L,豆浓30mL/L,K2HPO4·3H2O2.2g/L,MgSO4·7H2O0.9g/L,NH3NO36g/L,尿素3g/L;
⑶液体发酵培养基成分:口服葡萄糖80g/L,Na2HPO4·12H2O3.85g/L,VB10.4mg/L,MgSO4·7H2O2g/L,MnSO45mg/L,FeSO45mg/L,ZnSO45mg/L,KCl1.333g/L,玉米浆3mL/L,糖蜜1.1g/L,豆浓10mL/L。
4.根据权利要求1至3中任一项所述的方法,其特征在于:所述的谷氨酸棒状杆菌,替换为芽孢杆菌类细菌,肠杆菌科细菌、或酵母类真菌。
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