[发明专利]两亲聚合物-PDGF复合物

说明书

本申请是申请日为2006年9月26日、申请号为200680044233.5、发明名称为“两亲聚合物-PDGF复合物”的发明专利申请的分案申请。

技术领域

本发明涉及与两亲聚合物结合的血小板源生长因子（PDGF）的新型复合物，其可以改善用于药物应用的治疗性蛋白质的体外和体内物理和化学稳定性。

背景技术

PDGF类是通过经由两个二硫化物桥彼此连接的两个多肽链构成的大约30000道尔顿的糖蛋白类。已经识别出四种类型的链：A、B、C和D。天然蛋白质以同二聚体或AB型异二聚体的形式存在（Oefner C.EMBO J.11,3921-2926,1992）。

PDGF最初分离自血小板。PDGF类是在血液凝结过程中释放出来的能够促进各种细胞类型的生长的生长因子（Ross R等人，Proc.Natl.Acad.Sci.USA,1974,71,1207；Kohler N.&Lipton A.,Exp.Cell Res.,1974,87,297）。已知的是，血小板以外的某些细胞也会产生PDGF，其对于多数源自间叶细胞的细胞即血液、肌肉、骨骼和软骨细胞以及结缔组织细胞来说是促有丝分裂的（Raines E.W.,“Biology of Platelet-Derivated Growth Factor（血小板源生长因子生物学）”，1993，Westermark,B.和C.Sorg,Ed.Basel,Kerger,第74页）。许多文章往往也证实，巨噬细胞源PDGF对于平滑肌细胞起到趋化和促有丝分裂剂的作用并且其有助于动脉硬化特有的动脉壁的肌内膜增厚（Ross R等人，Science（科学）,1990,248,1009）。PDGF的活性此外还特别包括刺激嗜中性单核细胞的微粒释放（Tzeng D.Y等人，Blood（血液）,1985,66,179），促进间质细胞的类固醇合成（Risbridger G.P.,Mol.Cell,Endocrinol.,1993,97,125），刺激嗜中性吞噬作用（Wilson E等人，Proc.Natl.Acad.Sci.USA,1987,84,2213），调节凝血栓蛋白表达和分泌（Majak R.A等人，J.Biol.Chem.,1987,262,8821），以及血管平滑肌细胞中ICAM-1基因的后调节（Morisaki N等人，Biochem.Biophys.Res.Commun.,1994,200,612）。

由于这些不同性质，已经设想了重组PDGF类在制药领域中的应用。PDGF已经特别被批准用于糖尿病足部溃疡的治疗（Regranex,J&J）和用于牙周修补（GEM21S,Biomimetic）。

溃疡愈合，就像一般来说的皮肤愈合一样，是一种复杂的现象，其要求许多细胞类型随时间和在空间上的协调干预，这可以概括为三个阶段：发炎阶段、增殖阶段和重塑阶段。

在对正常愈合而言大约7天的发炎阶段中，巨噬细胞杀死细菌，清除受损组织并使组织再生。为此，巨噬细胞分泌出胶原酶、细胞因子和生长因子。

在对正常愈合而言从第3天到第三周的增殖阶段的过程中，相继发生三个事件。伤口被肉芽组织填充，血管生成且伤口被上皮细胞覆盖。肉芽组织从边缘向中心生长。成纤维细胞大量产生III型胶原。

在从第3周到1甚至2年的重塑过程中，肉芽组织成熟，且成纤维细胞产生较少胶原。通过细胞凋亡消除肉芽形成过程中形成的没用的血管。III型胶原被I型胶原替代，其依照张力线组织和交联。

在此过程中，PDGF起到基本作用。在伤口形成过程中，血小板聚集并释放PDGF。PDGF将嗜中性白细胞、巨噬细胞和成纤维细胞引向伤口并且是有力的促细胞分裂剂。巨噬细胞和内皮细胞又合成和分泌PDGF。PDGF刺激成纤维细胞产生新的细胞外基质，基本是非胶原化合物，例如葡胺聚糖和粘着蛋白（J.F.Norton等人，Essential practice of surgery（外科基本实践）,Springer,2003,第7章，77-89）。

慢性伤口例如糖尿病足部溃疡、静脉溃疡和压疮具有愈合非常缓慢且有时不完全的特性，这是因为愈合过程不是正常进行（R.Lobmann等人，J.of Diabetes and its complications（糖尿病及其并发症杂志）,2006,20,329-335）。