[发明专利]一种利用SSR分子标记鉴定苎麻品种的方法有效
| 申请号： | 201310120547.0 | 申请日： | 2013-04-09 |
| 公开（公告）号： | CN103194539A | 公开（公告）日： | 2013-07-10 |
| 发明（设计）人： | 陈建华;栾明宝;王晓飞;许英;孙志民;邹自征 | 申请（专利权）人： | 中国农业科学院麻类研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 长沙市融智专利事务所 43114 | 代理人： | 袁靖 |
| 地址： | 410205 湖南*** | 国省代码： | 湖南;43 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 利用 ssr 分子 标记 鉴定 苎麻 品种 方法 | ||
1.一种利用SSR分子标记鉴定苎麻品种的方法，其特征在于，包括以下步骤：
（1）提取各样品苎麻种质DNA；
（2）利用设计的8对苎麻EST-SSR引物，扩增苎麻的基因组DNA；
（3）记录每个样品每对引物的DNA扩增带型；
（4）根据DNA扩增带型区分鉴定苎麻品种；
所述的8对苎麻EST-SSR引物序列如下：
ibfc50：F:AACAATCCAGGAGTGGCAATC
R:ACAAGCGAAGATCGTCTCATC；
ibfc40F:TGTATAGAACTGAGTAAATGATTG
R:CAACTTTCTTAAACCACTTTCG；
Ibfc27F:AGCCAGGTTCCAGAAGTCC
R:CATAATCACAAAGTCTCGGTTCC；
Ibfc11F:GCGGAGGCTTAATTTGCTTTG
R:ACTCAATACATACACGGCACTAG；
ibfc65F:ACGAACCACAACACAGAGAG
R:ACGAGGGAACACCAGAGAG；
ibfc62F:GAAACTATTTCCACCAACAAAG
R:ACACACATTCCTACACACC；
ibfc53F:GGCTCAAGTTTGCTCATAGATTC
R:CGGCTTCGCTTTAGGATTTG；
ibfc20F:AGTGCGGAGATAACTGTTC
R:GGCTACTTTATTCTAAACCAAAC。
2.根据权利要求1所述的利用SSR分子标记鉴定苎麻品种的方法，其特征在于，PCR反应体系:20μL，
体系中余量为水。
3.根据权利要求1所述的利用SSR分子标记鉴定苎麻品种的方法，其特征在于，
PCR扩增程序：95℃预变性5min，94℃变性1min，根据引物的退火温度复性50sec，72℃延伸1min，29次循环后72℃延伸10min；
引物Ibfc50、ibfc40、ibfc27、ibfc11、ibfc65、ibfc62、ibfc53、ibfc20的退火温度分别为：50°C、52°C、56°C、51°C、60°C、54°C、56°C、54°C。
4.根据权利要求1所述的利用SSR分子标记鉴定苎麻品种的方法，其特征在于，步骤（4）具体是对每个样品不同的DNA扩增带型赋值，构建苎麻SSR分子标记身份证，以区分苎麻品种。
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