[发明专利]一种提取耐甲氧西林金黄色葡萄球菌DNA的方法有效
申请号: | 201310124795.2 | 申请日: | 2013-04-11 |
公开(公告)号: | CN103160499A | 公开(公告)日: | 2013-06-19 |
发明(设计)人: | 金姝;朱晴晖;邹玉涵;黄德魁;童平 | 申请(专利权)人: | 上海市普陀区人民医院 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10 |
代理公司: | 上海百一领御专利代理事务所(普通合伙) 31243 | 代理人: | 马育麟 |
地址: | 200060 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 提取 耐甲氧 西林 金黄色 葡萄球菌 dna 方法 | ||
1.一种提取耐甲氧西林金黄色葡萄球菌DNA的方法,其特征在于,其包括如下步骤:
1)裂解液的配置,各组分含量如下:20mM Tris; 2mM Na2-EDTA; 1.0%Triton x-100; 20mg/ml溶菌酶; 0.05g/ml-0.15g/ml chelex100; 90ug/ml -100ug/ml溶葡萄球菌酶; 1.8 mg/ml -2mg/ml蛋白酶K;其余为无菌水;pH8.0;
2)取5-10个生长于血平板上的金黄色葡萄球菌菌落,混悬于100ul上述裂解液中,56℃ 30min,100℃ 10min,12000rpm离心10min;
3)最后取上清液。
2. 根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述裂解液的组分为:20mM Tris; 2mM Na2-EDTA; 1.0%Triton x-100; 20mg/ml溶菌酶; 0.1g/ml chelex100; 100ug/ml溶葡萄球菌酶; 2mg/ml蛋白酶K;其余为无菌水; pH8.0。
3. 一种用于提取耐甲氧西林金黄色葡萄球菌DNA的裂解液,其特征在于,所述裂解液的成分为:20mM Tris; 2mM Na2-EDTA; 1.0%Triton x-100; 20mg/ml溶菌酶; 0.05g/ml -0.15g/ml chelex100; 90ug/ml -100ug/ml溶葡萄球菌酶; 1.8 mg/ml -2mg/ml蛋白酶K;其余为无菌水;pH8.0。
4. 根据权利要求3所述的裂解液,其特征在于,所述裂解液的组分为:20mM Tris; 2mM Na2-EDTA; 1.0%Triton x-100; 20mg/ml溶菌酶; 0.1g/ml chelex100; 100ug/ml溶葡萄球菌酶; 2mg/ml蛋白酶K;其余为无菌水; pH8.0。
5. 权利要求3或4所述的裂解液,其特征在于:用于提取耐甲氧西林金黄色葡萄球菌DNA中的应用。
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