[发明专利]一种多肽的液相合成方法

权利要求书

1.一种多肽的液相合成方法，其特征在于包括以下步骤：

以叔丁基-丝氨酸叔丁酯或其盐酸盐为起始原料，先与N-苄氧羰基-L-天冬酰胺进行缩合反应，反应产物脱去N-苄氧羰基得到Asn-Ser(tBu)-OtBu二肽，将Asn-Ser(tBu)-OtBu二肽与N-芴甲氧羰基-S-三苯甲基-L-半胱氨酸进行缩合反应，反应产物脱去N-芴甲氧羰基得到Cys(Trt)-Asn-Ser(tBu)-OtBu三肽；将Cys(Trt)-Asn-Ser(tBu)-OtBu三肽与N-芴甲氧羰基-L-谷氨酰胺进行缩合反应，反应产物脱去N-芴甲氧羰基得到Gln-Cys(Trt)-Asn-Ser(tBu)-OtBu四肽；将Gln-Cys(Trt)-Asn-Ser(tBu)-OtBu四肽与N-叔丁氧羰基-L-蛋氨酸进行缩合反应，得到Met(Boc)-Gln-Cys(Trt)-Asn-Ser(tBu)-OtBu五肽；将Met(Boc)-Gln-Cys(Trt)-Asn-Ser(tBu)-OtBu五肽上的保护基Boc、Trt和tBu脱去得Met-Gln-Cys-Asn-Ser五肽。

2.如权利要求1所述的多肽的液相合成方法，其特征在于包括以下步骤：

(1)以叔丁基-丝氨酸叔丁酯或其盐酸盐为起始原料，在有机溶剂、缩合剂和有机胺作用下，与N-苄氧羰基-L-天冬酰胺进行反应，反应产物经含洗涤、干燥工序处理，得Asn(Cbz)-Ser(tBu)-OtBu二肽；

(2)采用脱保护试剂将Asn(Cbz)-Ser(tBu)-OtBu二肽上的N-苄氧羰基(Cbz)脱去，得到Asn-Ser(tBu)-OtBu二肽；

(3)将Asn-Ser(tBu)-OtBu二肽与N-芴甲氧羰基-S-三苯甲基-L-半胱氨酸在有机溶剂、缩合剂作用下进行反应，反应产物经含洗涤、干燥、重结晶工序处理，得Fmoc-Cys(Trt)-Asn-Ser(tBu)-OtBu三肽；

(4)采用脱保护试剂将Fmoc-Cys(Trt)-Asn-Ser(tBu)-OtBu三肽上的Fmoc脱去，得到Cys(Trt)-Asn-Ser(tBu)-OtBu三肽；

(5)将三肽Cys(Trt)-Asn-Ser(tBu)-OtBu与N-芴甲氧羰基-L-谷氨酰胺在有机溶剂、缩合剂作用下进行反应，反应产物经含洗涤、干燥工序处理，得Fmoc-Gln-Cys(Trt)-Asn-Ser(tBu)-OtBu四肽；

(6)采用脱保护试剂将Fmoc-Gln-Cys(Trt)-Asn-Ser(tBu)-OtBu四肽上的Fmoc脱去，得到Gln-Cys(Trt)-Asn-Ser(tBu)-OtBu四肽；

(7)将Gln-Cys(Trt)-Asn-Ser(tBu)-OtBu四肽与N-叔丁氧羰基-L-蛋氨酸在有机溶剂、缩合剂作用下进行反应，反应产物经含洗涤、干燥、重结晶工序处理，得结晶体Met(Boc)-Gln-Cys(Trt)-Asn-Ser(tBu)–OtBu五肽；

(8)将结晶体Met(Boc)-Gln-Cys(Trt)-Asn-Ser(tBu)-OtBu五肽上的保护基Boc、Trt和tBu脱去并纯化得Met-Gln-Cys-Asn-Ser五肽。

3.如权利要求2所述的多肽的液相合成方法，其特征在于步骤(1)、(3)、(5)和(7)中的所述的有机溶剂包括二氯甲烷、四氢呋喃、苯、甲苯、乙腈、DMF或NMP中的一种或几种。

4.如权利要求2所述的多肽的液相合成方法，其特征在于步骤(1)、(3)、(5)和(7)中的所述的缩合剂包括HOBt、DIC、DCC、PyBOP或BOP中的一种或几种。

5.如权利要求2所述的多肽的液相合成方法，其特征在于步骤（2）中采用的具体方法是将Asn(Cbz)-Ser(tBu)-OtBu二肽溶于适宜的有机溶剂中，加入钯碳进行还原反应，得到Asn-Ser(tBu)-OtBu二肽。