[发明专利]峨眉拟单性木兰组织培养方法

权利要求书

1.一种峨眉拟单性木兰组织培养方法，其特征在于该方法包括下列步骤: 

1）外植体处理：取峨眉拟单性木兰嫩枝，清洗后，在无菌条件下，用质量浓度70%的酒精消毒30s，质量浓度0.01% 的HgCl₂ 溶液灭毒10-15 min，用无菌水冲洗5-6 次；

2）诱导培养：将经灭毒的嫩枝，取1cm长茎尖作外植体，接种于诱导培养基，培养温度27±2°C，光照12h，光照强度2000Lx，培养40-45天即可长成3 cm 左右的嫩梢；

3）分化培养：从诱导培养基上剪切已萌动的嫩梢，转入分化培养基，培养温度27±2°C，光照12h，光照强度2000Lx，20天每个接种的嫩梢可分化出大于0.5 cm的有效不定芽达4个左右，培养时间为45天；

4）生根培养：从分化培养基上剪下长高至3-4 cm的试管苗嫩梢，转入生根培养基，培养温度27±2°C，光照12h，光照强度2000Lx，培养时间为20天，生根率达80%以上；

5）炼苗培养：将组培苗瓶移至室外，自然光下封口炼苗10-15天，取出组培苗将根部的琼脂洗净，移栽到经过0.2% 的高锰酸钾消毒的蛭石中，浇透水，用塑料膜保湿，置于23-30°C的温室中生长，半个月后将苗栽于营养钵中，于遮光50%的阴棚下放置30天，即可进行常规管理。

2.根据权利要求1所述的一种峨眉拟单性木兰组织培养方法，其特征在于所述诱导培养基以MS为基础培养基，添加6-BA 2.0 mg/L，IAA 0.02 mg/L， KT 1.5 mg/L，蔗糖3%，琼脂0.5%，pH 5.8。

3.根据权利要求1所述的一种峨眉拟单性木兰组织培养方法，其特征在于所述分化培养基以MS为基础培养基，添加6-BA 0.5 mg/L，NAA 0.02 mg/L，蔗糖3%，琼脂0.5%，pH 5.8。

4.根据权利要求1所述的一种峨眉拟单性木兰组织培养方法，其特征在于所述生根培养基以1/2MS为基础培养基，添加NAA 0.5 mg/L，IBA 2.5 mg/L，蔗糖1.5%，琼脂0.5%，pH 5.8。