[发明专利]一种重组表达木聚糖酶基因的毕赤酵母工程菌及其应用在审
申请号: | 201310129942.5 | 申请日: | 2013-04-15 |
公开(公告)号: | CN104099311A | 公开(公告)日: | 2014-10-15 |
发明(设计)人: | 肖志壮;徐晓东;付娟;王霁昀;刘安邦;王海;刘鲁民;刘国栋;陈梅;曲音波 | 申请(专利权)人: | 青岛蔚蓝生物集团有限公司 |
主分类号: | C12N9/42 | 分类号: | C12N9/42;C12P19/14;C12N1/19;C12R1/80;C12R1/84 |
代理公司: | 北京汇泽知识产权代理有限公司 11228 | 代理人: | 张瑾 |
地址: | 266061 山东省青岛市*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 重组 表达 聚糖 基因 酵母 工程 及其 应用 | ||
1.一种木聚糖酶,其具有:
1)SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列;或者
2)在SEQ ID NO:1中取代、缺失或添加一个或几个氨基酸得到的具有斜卧青霉的木聚糖酶活性的氨基酸序列。
2.权利要求1所述的木聚糖酶,其编码基因为
1)核苷酸序列SEQ ID NO:2所示的DNA分子;或者
2)在严格条件下与SEQ ID NO:2所示核苷酸序列杂交且编码具有木聚糖酶活性的蛋白质的DNA分子。
3.一种木聚糖酶,其在pH4.0-7.0的范围内能保持80%以上的活性,在温度40-70℃的范围内,能保持50%以上的活性,最适pH值为5.0,最适反应温度为60℃。
4.权利要求1至3中任一项所述的木聚糖酶在生产低聚木糖中的用途。
5.一种重组毕赤酵母工程菌,其携带有含权利要求1至3中任一项所述木聚糖酶的编码基因的表达载体。
6.权利要求5所述的重组毕赤酵母工程菌,其中所述的表达载体为pPIC9K。
7.权利要求5或6所述的重组毕赤酵母工程菌,其中所述的毕赤酵母工程菌为毕赤酵母菌株GS115。
8.权利要求5至7中任一项所述的重组毕赤酵母工程菌在在生产低聚木糖中的用途。
9.一种生产低聚木糖的方法,该方法包括:
(1)发酵培养权利要求5至7中任一项所述的重组毕赤酵母工程菌,获得木聚糖酶;
(2)用获得的木聚糖酶酶解含木聚糖的原料,得到低聚木糖产物。
10.权利要求9所述的生产低聚木糖的方法,其中所述的低聚木糖产物中低聚木二糖~低聚木七糖的含量高于70%,低聚木二糖~低聚木四糖含量高于50%,单糖含量低于30%。
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