[发明专利]一种分步酶解羊乳酪蛋白制备ACE抑制肽的方法无效
| 申请号： | 201310132335.4 | 申请日： | 2013-04-16 |
| 公开（公告）号： | CN103215332A | 公开（公告）日： | 2013-07-24 |
| 发明（设计）人： | 陈合;王娟;舒国伟 | 申请（专利权）人： | 陕西科技大学 |
| 主分类号： | C12P21/06 | 分类号： | C12P21/06 |
| 代理公司： | 西安智大知识产权代理事务所 61215 | 代理人： | 弋才富 |
| 地址： | 710021 陕西省*** | 国省代码： | 陕西;61 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 分步 酶解羊 乳酪 蛋白 制备 ace 抑制 方法 | ||
1.一种分布酶解羊乳酪蛋白制备ACE抑制肽的方法，其特征在于：包括以下步骤：
步骤1：将复原羊乳冷却到4℃，使用高速离心机在6400rpm下离心15min后，除去脂肪，得到脱脂乳；
步骤2：将所得脱脂乳在35-75℃范围内的恒温水浴箱中进行保温，采用磁力加热搅拌器进行搅拌，搅拌速度为0-1600rpm，边搅拌边滴加HCl溶液，使脱脂乳溶液的pH值为4.2-5.0，使用高速离心机在6400rpm下离心15min将酪蛋白进行沉淀，弃去上清液，将沉淀的酪蛋白进行冷冻干燥，在温度为-40℃预冻12h，再转移到冷冻干燥机在-55℃下冷冻干燥24h，得到酪蛋白冻干粉，测定酪蛋白得率；
步骤3：将所得酪蛋白冻干粉与纯净水混合，制成质量浓度为10%的酪蛋白溶液，用180w的超声波预处理60min。
步骤4：从所得酪蛋白溶液中取出100ml，在45-65℃的恒温水浴箱中进行保温，滴入1mol/l的NaOH溶液，使酪蛋白溶液的pH值为6.5-8.5；按照酶与底物质量比为2-10:100的比例，加入碱性酶Alcalase，水解1-3h时；水解过程中，每间隔0.5h取5ml水解液，在90℃的恒温水浴箱中保持10min，使碱性酶Alcalase失活，然后使用高速离心机在9000rpm的条件下离心20min，除去未水解的酪蛋白，收集上清液并采用紫外分光光度法测定ACE抑制活性；
步骤5：将所得上清液吸取50ml，在35-55℃的恒温水浴箱中进行保温，滴入1mol/l的NaOH溶液，使该溶液的pH值为7.0-9.0，分别加入质量比为1:1、1:2、2:1、4:1的中性蛋白酶和胰蛋白酶，所用的酶与底物质量比为2-10：100，水解5h；水解过程中，每间隔1h取5ml水解液，在90℃的恒温水浴箱中保持10min，使碱性酶Alcalase失活，使用高速离心机在9000rpm的条件下离心20min，除去未水解的酪蛋白，收集上清液并采用紫外分光光度法测定ACE抑制活性，并对上清液进行冷冻干燥，得到ACE抑制肽。
2.根据权利要求1所述的一种分布酶解羊乳酪蛋白制备ACE抑制肽的方法，其特征在于：所述复原羊乳为羊奶粉与纯净水按照质量比例1:9进行混合溶解所得到的溶液。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于陕西科技大学，未经陕西科技大学许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201310132335.4/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
