[发明专利]一种改良的同时定量检测多个细胞因子的抗体芯片试剂盒有效
申请号: | 201310135080.7 | 申请日: | 2013-04-17 |
公开(公告)号: | CN104111329A | 公开(公告)日: | 2014-10-22 |
发明(设计)人: | 黄若磐;毛应清 | 申请(专利权)人: | 广州瑞博奥生物科技有限公司;广州华南生物芯片研究中心 |
主分类号: | G01N33/543 | 分类号: | G01N33/543;G01N21/64 |
代理公司: | 广州三环专利代理有限公司 44202 | 代理人: | 刘宇峰 |
地址: | 510663 广东省广州市广州*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 改良 同时 定量 检测 细胞因子 抗体 芯片 试剂盒 | ||
1.一种改良的同时定量检测多个细胞因子的抗体芯片试剂盒,其特征在于:
反应装置包括固相载体,为用活性氨基包被的标准组织玻片;在一张玻片表面用非接触性点样仪将多种抗原特异性抗体通过微阵列的方式点有2×8个相同的抗体微阵列,将点有2×8个抗体微阵列的标准组织玻片用可拆装的2×8孔框架结构把玻片分割成16个互不干扰的小区,每个小区含有一个抗体微阵列;
反应剂包括:抗体混合液,所述抗体混合液为所述若干种特异性抗体的混合溶液,抗体混合液中的特异性抗体上标记有生物素;识别生物素标记的链霉亲和素,所述链霉亲和素标记有荧光染料,所述荧光染料为Cy3或具有类似吸收波长的荧光染料;细胞因子标准品,包含若干种所述的细胞因子的具有梯级浓度的混合物。
2.根据权利要求1所述的试剂盒,其特征在于,所述的框架结构由三部分组成:上层塑料硬框,下层软乳胶片,和两侧的塑料夹板;通过两侧的塑料夹板将上层塑料硬框与下层软乳胶片紧扣在玻片上,形成矩阵为2×8的16孔抗体芯片;框架的每个孔的尺寸大小与常规ELISA的96孔板的孔间距相符,以致适用于标准ELISA系统的自动化操作。
3.根据权利要求1所述的试剂盒,其特征在于:所述的多种抗原特异性抗体是细胞-巨噬细胞集落刺激因子、干扰素γ、白介素-2、白介素4、白介素5、白介素6、白介素8、白介素10、白介素13和肿瘤坏死因子α这10种T细胞分泌因子的特异性抗体。
4.根据权利要求3所述的试剂盒,其特征在于:每种特异性抗体的点样浓度分别为200ug/ml;每个捕获抗体在每个抗体微阵列中有四次的重复。
5.根据权利要求4所述的试剂盒,其特征在于:每种特异性抗体的点样液为含有0.01-10g/100ml牛白蛋白的PBS缓冲液。
6.根据权利要求1所述的试剂盒,其特征在于:芯片处理完成后,拆除可拆装的框架,玻片由含Cy3通道的激光扫描仪扫描成像,所成的像用芯片读数软件将每个点的荧光信号转化为数码信号,再通过与细胞因子标准曲线的对应关系,定量测出样品中细胞因子的浓度。
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