[发明专利]一种安来霉素A与B分离方法有效

专利信息
申请号: 201310135343.4 申请日: 2013-04-17
公开(公告)号: CN103232530A 公开(公告)日: 2013-08-07
发明(设计)人: 胡永红;杨文革;李佼佼;管珺;开玉美;曹峥 申请(专利权)人: 南京工业大学
主分类号: C07K7/08 分类号: C07K7/08;C07K1/36;C07K1/34;C07K1/16
代理公司: 南京天华专利代理有限责任公司 32218 代理人: 徐冬涛;袁正英
地址: 211816 江*** 国省代码: 江苏;32
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摘要:
搜索关键词: 一种 霉素 分离 方法
【权利要求书】:

1.一种安来霉素A与B的分离方法,其具体步骤如下:

(1)将安来霉素发酵液抽滤,用蒸馏水冲洗滤饼,收集滤饼;

(2)将滤饼加入到有机溶剂中搅拌均匀后全部转移到珠磨机中珠磨,收集流出浆液;

(3)将流出浆液通过超滤膜浓缩6~10倍体积后过滤,收集得滤液;

(4)将滤液通过平衡好的大孔吸附树脂柱进行洗脱:先用盐溶液洗脱,再用有机溶剂A洗脱,收集得A液,当液相检测A液在5.0~5.2min无吸收峰时换有机溶剂B洗脱,收集得B液,当液相检测B液在7.3~7.5min无吸收峰后停止洗脱;

(5)将收集的A液和B液分别浓缩干燥,分别得到安来霉素A和B。

2.根据权利要求1所述的分离方法,其特征在于步骤(1)中加入的蒸馏水与发酵液的体积比为1~2:1。

3.根据权利要求1所述的分离方法,其特征在于步骤(2)中有机溶剂为盐酸的丙酮水溶液或者是盐酸的乙醇水溶液,其中有机溶剂中盐酸的摩尔浓度均为0.04~0.08mol/L,丙酮和乙醇的体积分数均为70%~95%;有机溶剂的加入量为有机溶剂与发酵液的体积比为1~3:1;珠磨条件为:珠磨温度30~50℃,转速5000~7000rpm,珠磨时间10~30min。

4.根据权利要求1所述的分离方法,其特征在于步骤(3)中超滤膜的截留分子量为2000~2400Da;超滤过程的压力为0.04~0.06Mpa;温度为30~50℃;流速为1.0~2.0mL/s。

5.根据权利要求1所述的分离方法,其特征在于步骤(4)中的大孔吸附树脂为AB-8、HPD400或HPD500;盐溶液为NaCl或KCl水溶液,盐溶液为质量分数0.5%-1.0%;有机溶剂A为甲醇的NaCl水溶液,其中NaCl水溶液的质量分数为0.5%-1.0%,甲醇与NaCl溶液的体积比为5~7:3;有机溶液B为体积分数90%-98%的乙醇或者是盐酸的甲醇水溶液,其中盐酸水溶液的摩尔浓度为0.004~0.006mol/L,甲醇与HCl水溶液的体积比为1~3:1。

6.根据权利要求1所述的分离方法,其特征在于步骤(4)中盐溶液的用量为2~4柱体积。

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