[发明专利]一种安来霉素A与B分离方法有效
申请号: | 201310135343.4 | 申请日: | 2013-04-17 |
公开(公告)号: | CN103232530A | 公开(公告)日: | 2013-08-07 |
发明(设计)人: | 胡永红;杨文革;李佼佼;管珺;开玉美;曹峥 | 申请(专利权)人: | 南京工业大学 |
主分类号: | C07K7/08 | 分类号: | C07K7/08;C07K1/36;C07K1/34;C07K1/16 |
代理公司: | 南京天华专利代理有限责任公司 32218 | 代理人: | 徐冬涛;袁正英 |
地址: | 211816 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 霉素 分离 方法 | ||
1.一种安来霉素A与B的分离方法,其具体步骤如下:
(1)将安来霉素发酵液抽滤,用蒸馏水冲洗滤饼,收集滤饼;
(2)将滤饼加入到有机溶剂中搅拌均匀后全部转移到珠磨机中珠磨,收集流出浆液;
(3)将流出浆液通过超滤膜浓缩6~10倍体积后过滤,收集得滤液;
(4)将滤液通过平衡好的大孔吸附树脂柱进行洗脱:先用盐溶液洗脱,再用有机溶剂A洗脱,收集得A液,当液相检测A液在5.0~5.2min无吸收峰时换有机溶剂B洗脱,收集得B液,当液相检测B液在7.3~7.5min无吸收峰后停止洗脱;
(5)将收集的A液和B液分别浓缩干燥,分别得到安来霉素A和B。
2.根据权利要求1所述的分离方法,其特征在于步骤(1)中加入的蒸馏水与发酵液的体积比为1~2:1。
3.根据权利要求1所述的分离方法,其特征在于步骤(2)中有机溶剂为盐酸的丙酮水溶液或者是盐酸的乙醇水溶液,其中有机溶剂中盐酸的摩尔浓度均为0.04~0.08mol/L,丙酮和乙醇的体积分数均为70%~95%;有机溶剂的加入量为有机溶剂与发酵液的体积比为1~3:1;珠磨条件为:珠磨温度30~50℃,转速5000~7000rpm,珠磨时间10~30min。
4.根据权利要求1所述的分离方法,其特征在于步骤(3)中超滤膜的截留分子量为2000~2400Da;超滤过程的压力为0.04~0.06Mpa;温度为30~50℃;流速为1.0~2.0mL/s。
5.根据权利要求1所述的分离方法,其特征在于步骤(4)中的大孔吸附树脂为AB-8、HPD400或HPD500;盐溶液为NaCl或KCl水溶液,盐溶液为质量分数0.5%-1.0%;有机溶剂A为甲醇的NaCl水溶液,其中NaCl水溶液的质量分数为0.5%-1.0%,甲醇与NaCl溶液的体积比为5~7:3;有机溶液B为体积分数90%-98%的乙醇或者是盐酸的甲醇水溶液,其中盐酸水溶液的摩尔浓度为0.004~0.006mol/L,甲醇与HCl水溶液的体积比为1~3:1。
6.根据权利要求1所述的分离方法,其特征在于步骤(4)中盐溶液的用量为2~4柱体积。
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