[发明专利]一种用于检测合成肽抗原浓度的检测方法有效
申请号: | 201310136201.X | 申请日: | 2013-04-18 |
公开(公告)号: | CN104111251A | 公开(公告)日: | 2014-10-22 |
发明(设计)人: | 孟丽媛 | 申请(专利权)人: | 申联生物医药(上海)有限公司 |
主分类号: | G01N21/78 | 分类号: | G01N21/78 |
代理公司: | 上海科盛知识产权代理有限公司 31225 | 代理人: | 蒋亮珠 |
地址: | 200241 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 用于 检测 合成 抗原 浓度 方法 | ||
1.一种用于检测合成肽抗原浓度的检测方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)配制标准合成肽溶液,将已知浓度的合成肽溶液先用蒸馏水稀释至浓度为1mg/ml,然后继续稀释至不同梯度浓度,即为配制的标准合成肽溶液样品:
(2)配制合成肽样品:将未知浓度的合成肽样品采用蒸馏水连续稀释至不向梯度浓度;
(3)以碱性酒石酸铜溶液作为A试剂,斐林试剂作为B试剂,将A试剂置于比色皿中,加入待检测样品,混合均匀,A试剂与待检测样品的体积比为5∶1;所述的待检测样品为标准合成肽溶液样品或者合成肽样品;
(4)继续加入B试剂,于室温避光反应20分钟,反应完全后,利用分光光度计测量OD750的吸光值,所述B试剂与A试剂的体积比为8∶1;
(5)根据标准合成肽溶液样品各梯度样品对应的数据绘制标准曲线,然后对合成肽样品吸光值对应标准曲线进行换算,计算得到相应的浓度值。
2.根据权利要求1所述的合成肽环化反应的物料输送装置,其特征在于,步骤(1)所述的已知浓度的合成肽溶液由市售合成肽样品冻干粉采用蒸馏水溶解精准定出浓度,所述不同梯度浓度的标准合成肽溶液样品的稀释倍数为1~32倍。
3.根据权利要求1所述的合成肽环化反应的物料输送装置,其特征在于,步骤(2)所述不同梯度浓度的合成肽样品的稀释倍数为1倍、5倍、10倍或20倍,每个样品皆重复2-3倍。
4.根据权利要求1所述的合成肽环化反应的物料输送装置,其特征在于,所述的碱性酒石酸铜溶液的浓度为1g/L,pH值为10。
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