[发明专利]一种双通道环境雌激素免疫传感器的制备方法及应用

说明书

技术领域

本发明属于纳米功能材料、环境检测、免疫分析及生物传感技术领域，具体涉及一种双通道环境雌激素电化学免疫传感器的制备方法及应用。

背景技术

大量环境有害物质随着人类的生产活动进入人类生活环境，对人类的健康产生极大危害。环境雌激素能够通过影响人类肾上腺、甲状腺等人体重要的内分泌腺体，使其不正常分泌，从而造成人体神经系统和免疫系统的功能障碍，严重影响人类身心健康。环境雌激素对人类生殖、发育和自身免疫性疾病影响极大，早已引起了人们的广泛关注。

环境雌激素种类繁多，大致分为以下几类：（1）农药类，如狄试剂，DDT等；（2）类固醇类，如雌二醇，雌酮等；（3）多氯联苯类，如多氯联苯等；（4）双酚类，如双酚A，壬基酚等；（5）二恶英类，如TCDD等；（6）酞酸酯类，如DMP等；（7）金属化合类，如三丁基锡。其中雌二醇、己烯雌酚、雌酮等在环境中最为常见。

雌二醇是一种人体自然分泌的激素，虽然对女性的正常发育有增进和调节作用，但过量摄入、不当摄入等对人类身体会有很大危害。另外，因为它能够改善牲畜瘦肉比，在禽畜饲养中也有应用。这就可能造成其在肉类中的残留，通过食物链而影响人类健康，造成女性过早发育，男性乳房发育，生殖系统异变，甚至有致癌作用。因此检测水体、肉类中的雌二醇非常重要。

己烯雌酚是一类人工合成的雌性激素，它具有和雌二醇相同的药理和治疗效果。怀孕期间如若服用己烯雌酚会对胎儿的健康产生极其严重的影响。它会造成胎儿的畸形、性特征逆转、脑积水等病变，并对孕妇的肝、肾、胆囊、胰腺等造成损伤。

在兽医临床中己烯雌酚也被用作于牲畜催情、助产等方面。己烯雌酚在食品动物中已被禁用，但还是有不法畜牧养殖商非法添加。

雌酮是雌二醇的氧化产物，其生物学作用低于雌二醇。在人体、妊娠动物和孕妇体内都有存在，它具有止血作用，但环境中的雌酮对人体肝脏、睾丸、心脏都有影响，而且会造成女性原发性或继发性卵巢功能减退。

对于环境雌激素的检测方法有很多，如色谱学方法，免疫学方法，电化学方法、生物分析法等，但多数需要贵重仪器，其操作复杂，检出限高，检测物质单一，因此，建立一种快速、简便、灵敏、且能同时检测多种物质的检测方法迫在眉睫。

免疫传感器是将免疫学方法和分析化学相结合的生物传感器，通过抗原与抗体的特异性结合，使得它具有灵敏、选择性高、快速、操作简便等优点。

电化学免疫传感器，结合了电化学方法，具有灵敏度高，选择性好、结构简单、操作简便、易于小型化、可连续、快速自动化检测分析等优点，制备了一种双通道环境雌激素免疫传感器，实现了两种环境雌激素的同时检测。

纳米材料在光学、热学、电学、磁学、力学以及化学方面的特殊性质，使其在生产、生活、科研等各方面都有很广泛的应用。本发明利用纳米材料修饰传感器，基于其特殊的物理化学性质，从而达到修饰传感器的目的。

石墨烯纳米层（GS）具有大的比表面积，催化性能好，能有效地吸附固载抗原，增强电子传递等优点。氨基化介孔四氧化三铁（AFMFe₃O₄）具有比表面积大、吸附性能好、原料低廉、制备简单等优点，能够稳定的固载抗体。

本发明采用石墨烯增强电极的电子传递能力，利用氨基化介孔四氧化三铁吸附金属离子，区分标记环境雌激素抗体，从而增大检测信号，并实现了两种环境雌激素的同时检测。

经对现有专利技术的检索发现，目前CN102323323A公开了一种17β-雌二醇分子印迹膜电化学传感器的制备方法，CN101059480A公开了一种玻碳电极修饰的电化学检测方法，其灵敏度低于电化学免疫方法。

CN101639478A公开了一种利用磁微粒化学发光免疫技术检测雌二醇的试剂盒。 CN102262125A公开了一种检测己烯雌酚的电化学免疫传感器的制备方法及应用，实现对一种雌激素的检测。

本发明提供了一种双通道环境雌激素免疫传感器的制备方法及应用，实现了两种环境雌激素的同时检测。

发明内容

本发明的目的之一是提供一种双通道环境雌激素免疫传感器的制备方法。

本发明的目的之二是将所制备的双通道免疫传感器，用于同时检测两种环境雌激素。

本发明的技术方案，包括以下步骤。

1. 一种双通道环境雌激素免疫传感器的制备方法，包括以下步骤：

（1）氨基化介孔四氧化三铁（AFMFe₃O₄）的制备