[发明专利]一种测定卷烟主流烟气总粒相物中苯并[a]芘的方法

说明书

技术领域：

本发明涉及一种测定卷烟主流烟气总粒相物中苯并[a]芘的方法，属于烟草化学成分的测定方法技术领域。

背景技术：

卷烟在高温缺氧的条件下燃烧，会产生多种稠环芳烃类物质，目前已鉴定出的200种左右，其中苯并[a]芘是最具有强致癌性的代表性化合物。因此，测定卷烟主流烟气中苯并[a]芘含量的大小对吸烟与健康的研究有着重要意义。

国外对卷烟主流烟气中苯并[a]芘的测定始于20世纪 60 年代，目前测定苯并[a]芘的方法主要有荧光分光光度法、气相色谱法、高效液相色谱法和气相色谱-质谱联用法等。但这些方法均存在两个问题：1）样品的前处理过程复杂，通常均要经过萃取、浓缩、纯化、再浓缩等步骤，复杂的前处理过程，一方面是耗时，降低分析效率，同时必然带来更多产生实验误差的环节和因素，实验结果的平行性差；2）检出限及灵敏度较差，由于卷烟中的苯并[a]芘含量在ng级的水平，而卷烟烟气粒相物中的物质又高达几千种，在这样一个复杂的背景下，常规的色谱分析仪器很难准确的对其进行定性定量分析，包括气相色谱-质谱联用法，采取选择离子模式，大多样品均只有很小的响应信号，且易干扰；3）分析时间长，由于卷烟烟气粒相物中成分高达几千种，而准确进行定性定量的前提是必须具备良好的分离度，因此通常分析时间均较长，如目前常用的GC/MS方法，每个样品需要一个小时左右的时间。因此有必要开发一种前处理相对简单、检出限低、灵敏度高、分析时间短的卷烟烟气粒相物中苯并[a]芘测定方法。

发明内容：

为克服现有技术的缺陷，本发明的目的在于提供一种测定卷烟主流烟气总粒相物中苯并[a]芘的方法，该方法前处理简单，重现性好，分析灵敏度高，能对卷烟烟气粒相物中苯并[a]芘进行准确定性定量分析。

本发明解决技术问题采用如下技术方案：

本发明的卷烟烟气粒相物中苯并[a]芘的测定方法，采用四氢呋喃：乙腈=1:10混合溶液为溶剂将卷烟烟气粒相物中的苯并[a]芘萃取出来，通过液相色谱-三重四级杆质谱联用仪（LC/MS/MS）进行定性定量分析其含量，采用内标法定量。包括以下步骤：

(1)、卷烟烟气总粒相物的收集：参照GB/T19609国标，将所用样品烟在（22±1）℃，相对湿度（60±2）%条件下平衡48小时，取20支卷烟在吸烟机上，采用标准抽吸条件，每口抽吸2s，抽吸容量35ml，间隔58s，总粒相物收集于玻璃剑桥滤片上。

(2)、卷烟烟气中苯并[a]芘的萃取和分析：取出上述剑桥滤片，放置于100ml锥形瓶中，准确加入1ml氘代苯并[a]芘内标溶液，然后加入5ml四氢呋喃和50ml的乙腈萃取液，超声提取40分钟。取2ml溶液过0.22um滤膜，装入色谱小瓶中待用。

液相色谱-质谱分析条件：

色谱条件：Waters UPLC，色谱柱：Acquity UPLC BEH C18 2.1×100mm 1.7um；流动相：水，乙腈溶液；柱温：40℃；进样量：10ul；掺杂剂：甲苯，流速为100u L/min；洗脱条件：0min，40%乙腈，6min,100%乙腈，保持1min，流速为 300uL/min 分析时间为7min。

质谱条件：AB Sciex 4000Qtrap，配备大气压光电离离子源；电喷雾电压：800V，雾化气：70Psi，气帘气：20Psi，辅助加热气:40Psi，离子源温度：800℃，去簇电压：70V，射入电压：10V，碰撞气能量：44V，驻留时间60ms。定量离子对为：253.1 / 252.1，氘代内标的定量离子对为：265.1 / 263.1。

工作曲线的绘制：

准确称取10mg苯并[a]芘标样，加入100mL容量瓶中，用乙腈定容至刻度，摇匀。再将此苯并[a]芘溶液分别稀释为0.2、5、10、20、50ng/mL的标准溶液。取各标准溶液分别进样HPLC分析，并以苯并[a]芘的峰面积(Y)对其浓度(X)进行回归分析，得到的回归方程y=2.96e+003x+35.9，相关系数为：0.99998。卷烟烟气总粒相物中苯并[a]芘的浓度由此回归方程得出。

与已有技术相比，本发明的有益效果体现在：