[发明专利]一种绣球菌抗肿瘤免疫活性的检测方法有效
申请号: | 201310139032.5 | 申请日: | 2013-04-18 |
公开(公告)号: | CN103197065A | 公开(公告)日: | 2013-07-10 |
发明(设计)人: | 吕正兵;董淮海;叶甫云 | 申请(专利权)人: | 上海科爱生物技术有限公司 |
主分类号: | G01N33/569 | 分类号: | G01N33/569 |
代理公司: | 上海衡方知识产权代理有限公司 31234 | 代理人: | 卞孜真 |
地址: | 200233 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 绣球 肿瘤 免疫 活性 检测 方法 | ||
1.一种绣球菌抗肿瘤免疫活性的检测方法,其特征在于包括以下工艺步骤:
1)取绣球菌葡聚糖蛋白复合体(SGP)样品,配制成溶液;
2)取THP-1细胞,调整细胞密度至105~106个/ml;
3)向步骤2)中培养得到的细胞中加入步骤1)的SGP溶液至终浓度达到10μg~2.0mg/ml,然后进行培养;
4)取步骤3)得到的培养物离心后收集细胞上清液;
5)取步骤4)得到的细胞上清液用ELASA法检测IFN-γ浓度,在SGP作用浓度为10μg~2.0mg/ml范围内,IFN-γ浓度与SGP浓度具有明显的正相关。
6)取ConA,按上述步骤检测IFN-γ浓度,控制ConA终浓度为1-3μg/ml,用ConA浓度值的10倍,作为抗肿瘤免疫活性因子水平(Anticancer Immune Factor,ACIF)值。
2.如权利要求1所述的检测方法,其特征在于所述的步骤1)中RPMI1640培养基配制SGP溶液。
3.如权利要求1所述的检测方法,其特征在于所述的步骤2)中用RPMI1640培养基调整THP-1细胞密度。
4.如权利要求1所述的检测方法,其特征在于所述的步骤2)中调整细胞密度的THP-1细胞置于37℃下进行培养24~36h。
5.如权利要求1所述的检测方法,其特征在于所述的步骤3)中加入SGP溶液后的细胞液置于37℃、CO2浓度5%的二氧化碳培养箱培养24~48h。
6.如权利要求1所述的检测方法,其特征在于抗肿瘤免疫活性水平用ACIF值来标示。
7.如权利要求1所述的检测方法,其特征在于ACIF值是ConA浓度值的10倍。
8.如权利要求1-7任意一项所述的检测方法,其特征在于该检测方法也适用于其它食用菌或药用菌的抗肿瘤免疫活性检测。
9.如权利要求8所述的检测方法,其特征在于所述食用菌或药用菌还包括灰树花、香菇、冬虫夏草等。
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