[发明专利]一种具有甘露糖化修饰的溶菌酶及其应用

权利要求书

1.一种糖基化溶菌酶，该溶菌酶经甘露糖基化修饰。

2.根据权利要求1所述的溶菌酶，其特征在于，所述溶菌酶为哺乳动物溶菌酶。

3.根据权利要求2所述的溶菌酶，其特征在于，所述溶菌酶为人源溶菌酶。

4.根据权利要求1所述的溶菌酶，其含有如下(a)、(b)或(c)所示的氨基酸序列：

(a)如序列表SEQ ID No.1所示的氨基酸序列；

(b)将序列表中SEQ ID No.1所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能的氨基酸序列；

(c)与(a)或(b)限定的氨基酸至少具有90%同源性且具有相同功能的氨基酸序列；

或含有如下(d)、(e)或(f)所示的氨基酸序列：

(d)如序列表SEQ ID No.2所示的氨基酸序列；

(e)将序列表中SEQ ID No.2所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能的氨基酸序列；

(f)与(d)或(e)限定的氨基酸至少具有90%同源性且具有相同功能的氨基酸序列；

所述氨基酸序列至少含有一个N-糖基化修饰位点N-X-S/T，且发生甘露糖基化修饰，其中X为除脯氨酸外的氨基酸。

5.编码权利要求1-4任一所述溶菌酶的基因。

6.根据权利要求5所述的基因，其特征在于核苷酸序列如SEQ IDNo.4所示。

7.含有权利要求5或6所述基因的重组载体。

8.根据权利要求7所述的重组载体，其特征为所述重组载体为pPICZαA-hLYZ，具有1所示的图谱。

9.包含权利要求5或6所述基因或权利要求7或8所述重组载体的重组菌。

10.根据权利要求9所述的重组菌，其特征在于所述重组菌为酵母。

11.一种制备权利要求1～4任一项所述溶菌酶的方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)用权利要求7或8所述的重组载体转化宿主菌，得到重组菌株；

(2)培养重组菌株，诱导糖基化修饰溶菌酶的表达；

(3)回收并纯化所表达的溶菌酶。

12.权利要求1～4任一项所述的溶菌酶在杀死胞内菌中的应用。