[发明专利]一种提高拜氏梭菌木糖消耗率的方法

权利要求书

1.一种重组拜氏梭菌，其与野生型拜氏梭菌相比，xylR基因表达和/或xylR蛋白的活性被抑制，arar基因表达和/或arar蛋白的活性被抑制，和/或木糖转运蛋白的活力和/或其编码基因的表达提高。

2.如权利要求1所述的重组拜氏梭菌，其特征在于，所述重组拜氏羧菌通过选自下组一种或多种的基因工程化处理获得的：在拜氏梭菌基因组的xylR基因中插入外源DNA片段、通过同源重组敲除全部或部分所述xylR基因、和采用反义核酸技术抑制xylR基因的表达；在拜氏梭菌基因组的araR基因中插入外源DNA片段、通过同源重组敲除全部或部分所述araR基因、和采用反义核酸技术抑制araR基因的表达；在拜氏梭菌基因组中导入额外的木糖转运蛋白、引入提高木糖转运蛋白的表达或活力的突变、或提供表达木糖转运蛋白的表达载体。

3.如权利要求2所述的重组拜氏羧菌，其特征在于，所述拜氏梭菌基因组中xylR基因第1位到第798位碱基之间插入外源DNA片段。

4.如权利要求3所述的重组拜氏梭菌，其特征在于，所述xylR基因的第1位到第171位碱基之间插入了外源DNA片段，或在所述xylR基因的第240和第798位之间插入了外源DNA片段。

5.如权利要求3所述的重组拜氏梭菌，其特征在于，在所述xylR基因的第787和第788位之间插入了外源DNA片段。

6.如权利要求2所述的重组拜氏梭菌，其特征在于，在所述拜氏梭菌基因组中araR基因第1位到第1074位碱基之间插入外源DNA片段。

7.如权利要求6所述的重组拜氏梭菌，其特征在于，所述araR基因的第15位到第219位碱基之间插入了外源DNA片段，或在所述araR基因的第252和第1005位之间插入了外源DNA片段。

8.如权利要求2所述的重组拜氏羧菌，其特征在于，所述拜氏梭菌导入了过表达木糖转运蛋白的重组质粒载体。

9.如权利要求8所述的重组拜氏梭菌，其特征在于，所述过表达重组质粒载体含有来源于丙酮丁醇梭菌ATCC824ptb基因的启动子和拜氏梭菌NCIMB8052xylT基因，或含有来源于丙酮丁醇梭菌ATCC824thl基因的启动子和拜氏梭菌NCIMB8052xylT基因。

10.保藏号为CCTCC NO：M2012014的重组拜氏梭菌。

11.一种方法，所述方法选自下组的一种或多种：

(1)提高拜氏梭菌发酵中木糖和/或阿拉伯糖的消耗率和/或利用率；

(2)提高拜氏梭菌产生溶剂的能力；

(3)提高拜氏梭菌发酵生产溶剂的效率；

其特征在于，包括步骤：抑制拜氏梭菌xylR蛋白的活性和/或其编码基因的表达，抑制拜氏梭菌araR蛋白的活性和/或其编码基因的表达，和/或提高木糖转运蛋白的活力和/或其编码基因的表达。

12.如权利要求11所述的方法，其特征在于，通过选自下组的方式抑制拜氏梭菌xylR基因表达：在所述拜氏梭菌基因组的xylR基因中插入外源DNA片段、通过同源重组敲除全部或部分所述xylR基因、和采用反义核酸技术抑制xylR基因的表达；通过选自下组的方式抑制拜氏梭菌araR基因表达：在所述拜氏梭菌基因组的araR基因中插入外源DNA片段、通过同源重组敲除全部或部分所述araR基因、和采用反义核酸技术抑制araR基因的表达；通过选自下组的方式提高拜氏羧菌木糖转运蛋白的表达：在拜氏梭菌基因组中导入额外的木糖转运蛋白、引入提高木糖转运蛋白的表达或活力的突变、和提供表达木糖转运蛋白的表达载体。

13.如权利要求12所述的方法，其特征在于，通过以下方式抑制拜氏梭菌xylR基因表达：在所述拜氏梭菌基因组中xylR基因第1位到第798位碱基之间插入外源DNA片段。

14.如权利要求13所述的方法，其特征在于，在xylR基因第1位到第171位碱基之间插入外源DNA片段，或在第240和第798位之间插入外源DNA片段。

15.如权利要求14所述的方法，其特征在于，在xylR基因的第787和第788位之间插入外源DNA片段。