[发明专利]一种测定食品酿造谷物类原料结合态香气物质的方法

权利要求书

1.一种测定食品酿造谷物类原料结合态香气物质的方法，其特征在于包括如下步骤：1）首先将谷物磨碎，然后通过有机溶剂的反复浸提，旋蒸至干去除有机相以及挥发性香气物质；2）用pH4～9的磷酸盐缓冲液溶解，并进一步分离挥发性香气物质后，通过固相微萃取最终得到结合态香气物质的前体物质；3）旋蒸至干后，再次用pH4～9的磷酸盐缓冲液溶解，通过物化作用或者酶解作用使结合态香气物质释放；4）然后通过HS-SPME-GC-MS测定香气物质的成分，并进行定性定量分析。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于所述原料为高粱、豌豆、大麦、玉米、大米、糯米、香米、小麦、黑麦、荞麦、黄米、粳米、麸皮。

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于有机溶剂浸提方法为，先用甲醇、乙醇、乙腈、丙酮单独或其复配的溶剂浸泡原料12～36h后，超声处理0.5～1h，离心后取上清，然后再将残渣用甲醇、乙醇、乙腈、丙酮单独或其复配的溶剂浸泡浸泡12～36h后，超声处理0.5～1h，离心后取上清，合并两次上清液备用。

4.如权利要求1所述的方法，其特征在于旋蒸至干去除有机相以及挥发性香气物具体条件为在常温和减压的条件下进行的，既可以除去易挥发的物质，又保证了结合态物质前体不会分解。

5.如权利要求1-4任一所述的方法，其特征在于进一步分离挥发性香气物质采用有机溶剂乙醚、戊烷、二氯甲烷、乙酸乙酯单独或复配反复萃取2～5次，以尽可能完全的将挥发性的香气物质萃取出来，排除挥发性香气物质的干扰。

6.如权利要求1-4任一所述的方法，其特征在于固相微萃取的工艺为将初步得到的结合态香气物质前体溶液通过Sep-Pak C18E固相萃取预装柱，用2～6倍柱体积的超纯水冲洗后，在用1～3倍柱体积的甲醇将结合态物质洗脱并接收，在30～40℃下减压旋蒸至干后用pH4～9的磷酸盐缓冲液溶解。

7.如权利要求6所述的方法，其特征在于固相微萃取参数为：样品流速为2～10mL/min，超纯水的流速为2～10mL/min，甲醇的流速为0.5～5mL/min。

8.如权利要求1所述的方法，其特征在于物化方法为：用盐酸调节pH为1～3，密闭处理后在80～100℃下水浴0.5～5h。

9.如权利要求1所述的方法，其特征在于酶解方法为添加β-D-葡萄糖苷酶，使得终浓度为5～10U/mL，密闭处理后，在25～45℃条件下缓慢振荡1～5d。

10.如权利要求8或9所述的方法，其特在于HS-SPME-GC-MS定性定量分析的方法为：通过将未知物质的质谱与NIST05a.L Datebase中的质谱进行比较，对相似度达70%以上且峰形较好的物质进行初步的定性，然后通过色谱图计算得到初步定性物质的保留指数，与相应酿造产品中的常规成分的标准品的保留指数进行比对进行定性。对已定性的物质进行定量分析：先配置最大浓度的待测物质的混合标样，然后梯度稀释为12～16个浓度，取每种浓度的混标加到15mL顶空瓶中，加入内标，再加入氯化钠饱和处理，进行HS-SPME-GC-MS的测定，利用标准品物质和内标物质峰面积比为横坐标、浓度比为纵坐标制作标准曲线，将待测样品中物质与内标物质的峰面积比值代入相应的标准曲线方程计算出待测物质的含量。