[发明专利]载胎盘生长因子纳米粒及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种载胎盘生长因子纳米粒的制备方法，其特征在于：其包括下述步骤：

（1）将内水相分散在油相中形成初乳；其中，所述的内水相为含有胎盘生长因子的水溶液；所述的油相为含有聚乳酸聚羟基乙酸共聚物和有机溶剂的有机溶液；所述的有机溶剂为极性在4.0～6.0之间的半极性有机溶剂；所述的内水相与油相的体积比为（1:3）～（1:10）；

（2）将上述初乳在外水相中乳化，形成复乳；其中，所述的外水相为含有稳定剂的水溶液；所述的稳定剂为HLB值8～18的亲水性非离子表面活性剂；所述的油相与外水相的体积比为（1:3）～（1:6）；

（3）将上述复乳与扩散相混合，去除有机溶剂和稳定剂，得待冻干溶液，冻干，即可；所述的扩散相为水或含有稳定剂的水溶液；所述的外水相与扩散相的体积比为（1:5）～（1:15）。

2.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于：

步骤（1）中，所述的聚乳酸聚羟基乙酸共聚物的粘均分子量为10,000～100,000；所述的聚乳酸聚羟基乙酸共聚物中乳酸、羟基乙酸嵌段比例为（50/50）～（85/15），所述的乳酸、羟基乙酸嵌段比为乳酸嵌段和羟基乙酸嵌段的重量比；

和/或，步骤（1）中，内水相中所述的胎盘生长因子的浓度为0.15～0.30mg/mL，所述的浓度为胎盘生长因子的质量与内水相的体积比；

和/或，步骤（1）中，所述的胎盘生长因子和聚乳酸聚羟基乙酸共聚物的质量比为（3:200）～（1:1500）。

3.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于：步骤（1）中，所述的内水相还含有亲水性生理相容性高分子；

所述的亲水性生理相容性高分子较佳的为含多羟基的能稳定蛋白的多糖类物质、含多羟基的能稳定蛋白的聚氨基酸类物质、聚丙烯酸和聚乙二醇中的一种或多种；所述的含多羟基的能稳定蛋白的多糖类物质较佳的为肝素、壳聚糖和透明质酸中的一种或多种；所述的含多羟基的能稳定蛋白的聚氨基酸类物质较佳的为聚谷氨酸；

内水相中，所述的生理相容性高分子的浓度较佳的为1%～5%，所述百分比为生理相容性高分子占内水相的重量百分比。

4.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于：步骤（1）中，所述的聚乳酸聚羟基乙酸共聚物的浓度为5～50mg/mL，较佳的为10～40mg/mL，所述的浓度为聚乳酸聚羟基乙酸共聚物的质量与有机溶液的体积比；

和/或，步骤（1）中，所述的有机溶剂为乙酸乙酯、乙醇和丙酮中的一种或多种；

和/或，步骤（1）中所述的分散的方法为机械分散，较佳的为超声分散；较佳的，所述的超声分散的功率为200W，所述的超声分散的时间为1～2min；

和/或，步骤（1）中，所述的内水相与油相的体积比为（1:4）～（1:6）。

5.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于：步骤（2）中，所述的稳定剂为普朗尼克、聚乙烯醇和吐温80中的一种或多种；

和/或，步骤（2）中，所述的外水相中稳定剂的浓度为15%～20%，所述百分比为稳定剂占外水相的重量百分比；

和/或，步骤（2）中，所述的乳化为高速剪切乳化或高压乳匀；所述的高速剪切乳化较佳的使用分散乳化机；所述的高速剪切乳化较佳的在冰浴条件下进行；所述的高速剪切乳化的剪切速度较佳的为10000～30000rpm；所述的高速剪切乳化的时间较佳的为0.5～3min。

6.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于：步骤（3）中，所述的含有稳定剂的水溶液中的稳定剂的浓度为2%以下，但不为0，所述百分比为稳定剂占扩散相的重量百分比。

7.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于：步骤（3）中，所述的有机溶剂的去除方法为磁力搅拌挥干或真空旋转蒸发；所述的磁力搅拌挥干的转速较佳的为100rpm～500rpm，所述的磁力搅拌挥干的时间较佳的为6h～12h；所述的真空旋转蒸发的时间较佳的为3h～6h；

和/或，步骤（3）中，所述的稳定剂的去除方法为高速离心；所述的离心的速度较佳的为3000～8000rpm；所述的离心的时间较佳的为3～10min；

和/或，步骤（3）中，所述的冻干的方法为直接冻干或与支架剂混合后冻干；较佳的，所述的支架剂为甘露醇、葡聚糖、乳糖和右旋糖苷中的一种或多种；较佳的，所述的支架剂的浓度为20～50mg/mL，所述浓度为支架剂的质量与待冻干溶液的体积比。