[发明专利]一种制备（R）-1-[（3，5-双三氟甲基）苯基]乙醇的方法

说明书

技术领域

本发明属于手性医药中间体制备领域，涉及一种生物催化法不对称制备手性医药中间体，具体涉及一种以羰基还原酶CR为生物催化剂，实现单一光学纯度的（R）-1-[（3，5-双三氟甲基）苯基]乙醇的绿色制备方法。

背景技术

（R）-1-[（3，5-双三氟甲基）苯基]乙醇是合成癌症辅助治疗药物阿瑞匹坦（Aprepitant）的重要手性砌块，其结构式为而阿瑞匹坦的结构式为2003年，阿瑞匹坦作为首个神经激肽-1（NK-1）的受体阻滞剂被美国FDA批准上市。作为癌症的辅助治疗药物，阿瑞匹坦主要可用于治疗和预防化疗诱发的急性、延迟性恶心和呕吐，同时，对周期性呕吐综合征也显示出一定疗效。恶心和呕吐是肿瘤患者在化学治疗后的最常见副反应，通常会导致患者放弃继续接受治疗和生活质量大幅降低。随着癌症患者的数目日益增多，全球对此类药物的需求量逐步增加。2010年，阿瑞匹坦的全球销售额高达7亿美元，据此趋势发展，阿瑞匹坦的市场前景将非常乐观。

单一光学纯度的（R）-1-[（3，5-双三氟甲基）苯基]乙醇是合成阿瑞匹坦关键手性中间体，其合成效率和光学纯度决定了阿瑞匹坦的产品质量和制备成本。因此，单一光学纯度的化合物（R）-1-[（3，5-双三氟甲基）苯基]乙醇手性中间体的制备具有实际应用价值。目前，该手性中间体制备方法主要包括拆分法和不对称合成法，其中，拆分法一般存在生产成本高、总得率低于50%、产物的光学纯度难以达到要求等缺点（参见：J.Am.Chem.Soc.2003，125:2129-2135）；不对称合成法主要有化学合成法和生物催化法，其中化学合成法的收率一般在70～90%，对映体过量(ee)值为50～82%，其所用催化剂价格昂贵，产物的光学纯度也不理想，且一般需要较高的氢气压力，对设备要求较高（参见：专利WO03/043575A2）

生物催化法具有高效、高立体选择性、反应条件温和等优点，近年来得到了研究者的青睐。随着阿瑞匹坦的上市销售，关于细菌或酶催化合成（R）-1-[（3，5-双三氟甲基）苯基]乙醇的报道日渐增多。Mirjana G.P.等人利用Lactobacillus kefir菌株中乙醇脱氢酶立体选择性地催化3，5-双三氟甲基苯乙酮还原生成（R）-1-[（3，5-双三氟甲基）苯基]乙醇，产物的对映体过量值（enantiomeric excess,ee）大于99%，但最大底物浓度仅仅为1.2g/L(5mM)，无法满足工业化生产的要求（参见：Terahedron:Asymmetry,2006,17:2000-2005）。Kurbanoglu E.B.等人从82株真菌中成功地筛选出了一种能够将3，5-双三氟甲基苯乙酮还原成（R）-1-[（3，5-双三氟甲基）苯基]乙醇的菌株，即Penicillium expansum菌株。然而，在1升的原位反应体系中反应56小时后，产物的产量仅为76%，即3.35g/L，产业化难度极大（参见：Terahedron:Asymmetry,2009,20:2759-2763）。

因此，建立一种高效制备（R）-1-[（3，5-双三氟甲基）苯基]乙醇的生物催化工艺以提高底物浓度、减少辅酶投入和简化生产流程，对提高阿瑞匹坦质量、降低生产成本和减少环境污染等具有广泛的实用价值和重要意义。

发明内容

本发明目的是建立一种制备手性化合物（R）-1-[（3,5-双三氟甲基）苯基]乙醇的生物合成方法。

为了达到上述目的，本发明所采用的技术方案如下：

一种制备手性化合物（R）-1-[（3，5-双三氟甲基）苯基]乙醇的方法，以3，5-双三氟甲基苯乙酮为底物，在辅酶循环再生体系中经羰基还原酶（CR）催化反应制备得到（R）-1-[（3，5-双三氟甲基）苯基]乙醇，其中羰基还原酶（CR）是从Corynebacterium ST-10菌中分离得到的，可参考文献Appl.Environ.Microb.1997，63：3783-3788中公开方法得到。

本发明所述的羰基还原酶（CR）适用于各类常规使用的辅酶循环再生体系，优选异丙醇所介导的辅酶循环再生体系，其中异丙醇的用量为反应液的5%～60%（v/v），或甲酸脱氢酶介导的辅酶循环再生体系。

上述辅酶循环再生体系中辅酶可以为通常选用的辅酶种类，优选NADH或NAD⁺，优选辅酶的浓度为0.05mM～5mM，更优选用量为0.05mM～2mM。