[发明专利]蛹虫草、培养方法和分离方法有效
申请号: | 201310163171.1 | 申请日: | 2013-05-07 |
公开(公告)号: | CN103283482A | 公开(公告)日: | 2013-09-11 |
发明(设计)人: | 熊艳 | 申请(专利权)人: | 熊艳 |
主分类号: | A01G1/04 | 分类号: | A01G1/04 |
代理公司: | 北京超凡志成知识产权代理事务所(普通合伙) 11371 | 代理人: | 吴开磊 |
地址: | 561000 贵州省*** | 国省代码: | 贵州;52 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 虫草 培养 方法 分离 | ||
1.蛹虫草(Cordycepes militaris)GZU-19,其保藏号为CCTCC NO:M2013056。
2.一种权利要求1所述的蛹虫草(Cordycepes militaris)GZU-19CCTCC NO:M2013056的培养方法,其特征在于,包括:
菌种活化,所述菌种活化包括将保藏的蛹虫草(Cordycepes militaris)GZU-19CCTCC NO:M2013056转接到萨氏培养基斜面进行活化培养;
将活化后蛹虫草(Cordycepes militaris)GZU-19CCTCCNO:M2013056的点种到萨氏培养基平板进行形态鉴定的生长培养,得到气生菌丝。
3.根据权利要求2所述的培养方法,其特征在于,
所述萨氏培养基每升中含有:麦芽糖10-20克,葡萄糖10-30克,蛋白胨8-23克,酵母膏4-15克,琼脂15-20克,硫酸镁0.1-1克,硫酸亚铁0.1-1克,氯化钾0.5-2克。
4.根据权利要求3所述的培养方法,其特征在于,
所述萨氏培养基每升中含有:麦芽糖5克,葡萄糖20克,蛋白胨10克,酵母膏5克,琼脂15-20克,硫酸镁0.5克,硫酸亚铁0.5克,氯化钾1克。
5.根据权利要求2所述的培养方法,其特征在于,所述菌种活化中活化培养温度为24℃-26℃,活化培养时间为5-7天。
6.根据权利要求2所述的培养方法,其特征在于,所述生长培养中生长培养温度为25℃,生长培养时间为14天。
7.根据权利要求2所述的培养方法,其特征在于,所述气生菌丝在萨氏培养基平板中的形态为:菌落圆形,直径34毫米,菌落中央隆起,其外有2或3个同心环,厚实为绒状,所述气生菌丝的产孢结构为拟青霉型。
8.根据权利要求7所述的培养方法,其特征在于,所述气生菌丝呈橙黄色至铬黄色,边缘的气生菌丝为白色,菌落背面呈浅黄色。
9.权利要求2所述的培养方法,其特征在于,所述方法还包括:蛹虫草(Cordycepes militaris)GZU-19CCTCC NO:M2013056的rDNA转录;
rDNA转录间区DNA序列片段为:
ACATGCTTAGGTTGGGCGTTTTACGGCGTGGCCACGTCGGGTTCCCGGTGCGAGTTGGAGTACTACGCAGAGGTCGCCGCGGACGGGCCGCCACTTCATTTCGGGGGCGGCGGTGTGCTGCCGGTCCCCAACGCCGACATCCCCCAGGGGACGTCGAGGGTTGAAATGAACGCTCGAACAGGCATGCCCGCCAGAATGCTGGCGGGCGCAATGTGCGTTCAAAGATTCGATGATTCACTGAATTCTGCAATTCACATTACTTATCGCATTTCGCTGCGTTCTTCATCGATGCCAGAGCCAAGAGATCCGTTGTTGAAAGTTTTGATTCATTTGTTTTGCCTTGCGGCGGATTCAGAAAAACTGGTAGATACAGTGTTTGGGGCCCCCGACGGCCGCCGCCCAGGCCGGCGTCCAGGCGCTGGGCGAGTCCGCCGAAGCAACGATAGGTATGTTCACAAAGGGTTGGGAGTTGGAAAACTCGTTAATGATCCCTCCGCTGGTTCACCAAGGGAGACCTTGTTACGACTTTTTCTTCCAGGA。
10.一种权利要求1所述的蛹虫草(Cordycepes militaris)GZU-19CCTCC NO:M2013056的分离方法,其特征在于,包括:
将采集得到的蛹虫草子实体用75%的乙醇进行表面消毒,然后用无菌解剖刀切开子座可孕部分,取一块组织或带子囊壳的组织接种到萨氏平板上,24℃-26℃培养4-5天,转接萨氏斜面,24℃-26℃培养6-7天,取出4℃保存。
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