[发明专利]蛹虫草、培养方法和分离方法有效
申请号: | 201310163171.1 | 申请日: | 2013-05-07 |
公开(公告)号: | CN103283482A | 公开(公告)日: | 2013-09-11 |
发明(设计)人: | 熊艳 | 申请(专利权)人: | 熊艳 |
主分类号: | A01G1/04 | 分类号: | A01G1/04 |
代理公司: | 北京超凡志成知识产权代理事务所(普通合伙) 11371 | 代理人: | 吴开磊 |
地址: | 561000 贵州省*** | 国省代码: | 贵州;52 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 虫草 培养 方法 分离 | ||
技术领域
本发明涉及微生物领域,具体而言,涉及蛹虫草GZU-19(Cordycepes militaris GZU-19)、培养方法和分离方法。
蛹虫草GZU-19(Cordycepes militaris GZU-19),保藏号为CCTCC NO:M2013056,保藏在中国典型培养物保藏中心(CCTCC),地址:中国.武汉.武汉大学,邮编:430072,保藏时间为2013年2月4日。
背景技术
蛹虫草又称北虫草、北冬虫夏草。蛹虫草无性型是蛹虫草拟青霉,无性型在单饱子菌株水平上,菌落特征、有性子实体形成能力、产孢结构等方面差异较大。蛹虫草含有丰富的活性物质,如虫草菌素、多糖、核苷、类胡萝卜素等,具有抗肿瘤、抗病毒、抗炎、抗菌、抗氧化、免疫调节等广泛的生理活性。
虫草素是蛹虫草最重要的活性物质之一,是一种核苷类抗生素,具有一系列的药理活性,如免疫调节作用、抗肿瘤作用、抗菌抗病毒作用、抗炎作用、抗白血病等作用。作为白血病治疗药物在美国已经进入三期临床试验。还有研究表明,虫草素对HIV-I型病毒也有抑制活性。蛹虫草是药食两用的中药和食品,市场的需求量很大。作为食品其虫草菌素的含量要求不高,但作为药源或直接用药对虫草菌素的要求就非常高。但目前人工种植的蛹虫草子实体虫草菌素含量都不高,一般在0.5%(占子实体干重)以下,远远不能满足药 用的需求,也远不能满足市场的需要。因此,解决这一问题的关键在于获得高效生物合成虫草菌素的菌株。
发明内容
本发明的目的在于提供蛹虫草拟青霉、培养方法和分离方法,以解决上述的问题。
在本发明的实施例中提供了蛹虫草GZU-19(Cordycepes militaris GZU-19),其保藏号为CCTCC NO:M2013056。
在本发明的实施例中提供了一种所述蛹虫草GZU-19(Cordycepes militaris GZU-19)CCTCC NO:M2013056的培养方法,包括:
菌种活化,所述菌种活化包括将保藏的蛹虫草GZU-19(Cordycepes militaris GZU-19)CCTCC NO:M2013056转接到萨氏培养基斜面进行活化培养;
将活化后蛹虫草GZU-19(Cordycepes militaris GZU-19)CCTCC NO:M2013056的点种到萨氏培养基平板进行生长培养,得到气生菌丝。
优化的,所述萨氏培养基每升中含有:麦芽糖10-20克,葡萄糖10-30克,蛋白胨8-23克,酵母膏4-15克,琼脂15-20克,硫酸镁0.1-1克,硫酸亚铁0.1-1克,氯化钾0.5-2克。
优化的,所述萨氏培养基每升中含有:麦芽糖5克,葡萄糖20克,蛋白胨10克,酵母膏5克,琼脂15-20克,硫酸镁0.5克,硫酸亚铁0.5克,氯化钾1克。
优化的,所述菌种活化中活化培养温度为24℃-26℃,活化培养时间为5-7天。
优化的,所述生长培养中生长培养温度为25℃,生长培养时间为14天。
优化的,所述气生菌丝在萨氏培养基平板中的形态为:菌落圆形,直径34毫米,菌落中央隆起,其外有2或3个同心环,厚实为绒状,所述气生菌丝的产孢结构为拟青霉型。
优化的,所述气生菌丝呈橙黄色至铬黄色,边缘的气生菌丝为白色,菌落背面呈浅黄色。
优化的,所述方法还包括:蛹虫草GZU-19(Cordycepes militaris GZU-19)CCTCC NO:M2013056的rDNA转录;rDNA转录间区DNA序列片段为:
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