[发明专利]草莓茎尖组培脱毒的快速繁殖方法

权利要求书

1.一种“久香”草莓茎尖组培脱毒的快速繁殖方法，其特征在于，包括外植体消毒、茎尖组织脱毒培养、增殖培养、生根培养、炼苗与移栽；具体步骤如下：

(1)外植体消毒：选取健壮无病的“久香”草莓母株匍匐茎上的顶芽1.5±0.5厘米，蘸少量洗涤液用手轻轻搓洗2～3次，流水冲洗90～120分钟后，再在超净工作台上用75%的酒精漂洗，无菌水清洗后，用0.5%次氯酸钠灭菌，无菌水冲洗，最后用无菌滤纸吸干表面水分；

(2)茎尖组织脱毒培养：在无菌条件和解剖显微镜下逐层剥去顶芽外层叶片，用解剖刀切下带一个长约0.2～0.3毫米叶原基的生长点，立即接种于分化培养基上，暗培养后进行光培养；

(3)增殖培养：4周后茎尖长出芽丛，待芽苗长至2±0.5厘米大小时将芽逐个切下分成单株，每瓶放5～6个芽，再转入增殖培养基中继续增殖，每28天增殖1代，增殖6～7代后获得大量无毒种苗；

(4)生根培养：将经过继代增殖培养的草莓芽苗由芽丛切下，转到生根培养基中促使其生根，在温度24±1℃条件下进行光照生根培养14～21天；

(5)炼苗移栽：将生根后的草莓脱毒苗置于待生长条件下炼苗7天，开瓶后瓶底加水炼苗3～4天，用镊子把组培苗从培养瓶中取出，清水洗净根系附带的培养基，移栽在栽培基质中遮光处理3～5天后，将草莓苗移到玻璃温室保持相对湿度75%进行炼苗。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(2)所述的分化培养基由MS基本培养基、白砂糖30克/升、琼脂8克/升，和植物生长激素0.01～0.4毫克/升组成，pH值为5.7～5.8。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述的植物生长激素为吲哚丁酸0.01毫克/升，和6-卞基腺嘌呤0.1～0.4毫克/升。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(2)的培养温度为24±1℃，光照强度4000lx，光照时间12小时。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(3)所述的增殖培养基由MS基本培养基、白砂糖30克/升、琼脂8克/升，和植物生长激素0.01～0.5毫克/升组成，pH值为5.7～5.8。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述的植物生长激素为吲哚丁酸0.01～0.03毫克/升，和6-卞基腺嘌呤0.1～0.3毫克/升。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(4)所述的生根培养基由1/2MS基本培养基、白砂糖10克/升、琼脂8克/升和植物生长激素0.01～0.02毫克/升组成，pH值为5.7～5.8。

8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述的植物生长激素为吲哚丁酸0.02毫克/升。

9.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(5)所述的栽培基质按椰糠:蛭石=5:1，V/V组成。

10.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(5)所述的将生根后的草莓脱毒苗置于待生长条件下炼苗7天，移栽时将组培瓶盖打一条缝，自然条件驯化2天，接着完全揭开瓶盖并添加10～15毫升蒸馏水锻炼1天。