[发明专利]草莓茎尖组培脱毒的快速繁殖方法

说明书

技术领域

本发明属植物组织培养领域，涉及一种“久香”草莓茎尖组培脱毒的快速繁殖方法。 

背景技术

近年来，随着草莓连作年限的增加及“丰香”、“红颜”等易感病品种的推广，草莓炭疽病的发生在国内呈大幅上升趋势。一般感病苗定植到田间后，到下年3月份大约80%的植株会随着生长而死亡。在上海等南方地区草莓果实收获从当年12月至下年的5月份，长达六个月，大量收获期在2、3、4月初。这样以来，草莓种植户将会遭受巨大损失。因此，推广与“丰香”、“红颜”等草莓果实品质媲美的抗病草莓新品种已成为迫在眉睫的问题。 

“久香”草莓是上海市农业科学院2007年新近育成的第一个适合于设施栽培且综合性状优良的草莓品种。“久香”草莓以久能早生为母本、丰香为父本杂交，历经10年育成的优质抗病草莓新品种。于2007年11月通过上海市农作物品种审定委员会审定。该品种长势强、株形紧凑，果实圆锥形、较大，第I、II级序果平均单果重21.6g；果形指数1.37，果肉红色，髓心浅红色，无空洞；果肉细，质地脆硬；汁液中等，甜酸适度，香味浓。“久香”草莓与主栽品种“丰香”、“红颜”相比，在白粉病和灰霉病的抗性突出，产量要高出主栽品种10%，货架期较主栽品种延长7天。因此，“久香”草莓适宜于长江流域和冬暖草莓产区广泛种植。 

目前，生产上“久香”草莓主要是通过无性繁殖为种植者提供种苗，而长期使用无性繁殖种苗在快速繁殖过程中常常会感染多种病毒，引起品种种性退化，抗病力减弱，从而造成单位面积产量和果实品质下降等问题。一般会减产30～80%，给草莓种植者带来经济损失。且随着无性繁殖代数的增加，病毒感染的几率也大大提高，草莓感染病毒后的直接表现为叶片皱缩、畸形果率增加、品质下降、植株生长发育迟缓等不良现象。 

不同的草莓品种由于遗传背景的差异，在茎尖生长发育过程中内源激素水平明显不同，因而，在采用茎尖脱毒组培快速繁殖法获得草莓种苗的过程中，对外源激素种类和浓度的要求也因品种不同而表现出较大差异。在相同的培养条件下，草莓基因型（不同品种）对茎尖诱导分化、增殖、生根等起着决定性作用。以诱导分化为例，采用相同的 分化培养基，分化诱导的百分率以“久香”最高（100%），而其他品种分别为“红颜”50%、“章姬”42%、“甜查理”33%、“丰香”最低仅23%。 

由于草莓在生产应用中主要是通过走茎育苗进行无性繁殖的，严重的影响草莓新品种自身的优良特性，且走茎繁殖育苗周期长，制约了“久香”草莓的示范应用和品种推广工作。“久香”草莓的种苗快速繁殖技术体系的建立将会直接助推草莓新品种在生产中的推广。加速“久香”的示范推广，对不断优化和更新上海市草莓品种结构，稳定和提升农民经济效益将具有重要的显示意义。 

发明内容

本发明所要解决的技术问题在于提供一种“久香”草莓茎尖组培脱毒的快速繁殖方法，以便进行规模化生产和繁殖满足市场需要，及以“久香”草莓组培为基础的其他学科的研究工作的需要。 

为了达到上述目的，本发明采用以下技术方案来实现。 

所述的“久香”草莓茎尖组培脱毒快速繁殖方法，包括外植体消毒、茎尖组培脱毒培养、增殖培养、生根培养、炼苗移栽，具体依照如下步骤进行： 

(1)外植体消毒：选取健壮无病的“久香”草莓母株匍匐茎上的顶芽大小约1.5±0.5厘米，蘸少量洗涤液用手轻轻搓洗2～3次，流水冲洗90～120分钟后，再在超净工作台上用75%的酒精漂洗，无菌水清洗后，用含0.5%次氯酸钠灭菌，无菌水冲洗，无菌滤纸吸干表面水。 

(2)茎尖组织脱毒培养：在无菌条件和解剖显微镜下逐层剥去顶芽外层叶片，用解剖刀切下带一个叶原基（长约0.2～0.3毫米）的生长点，立即接种于分化培养基上，暗培养后进行光培养，其中培养温度为24±1℃，光照强度为4000lx，光照时间为12小时。所述的分化培养基由MS基本培养基、白砂糖30克/升、琼脂8克/升，和植物生长激素0.01～0.4毫克/升组成，pH＝5.7～5.8。所述的植物生长激素为吲哚丁酸（IBA）0.01毫克/升，和6-卞基腺嘌呤（6-BA）0.1～0.4毫克/升；优选6-BA为0.15毫克/升，和IBA为0.01毫克/升。