[发明专利]Cystatin S和CYFRA21-1在制备诊断和预示食管癌标志物中的应用

说明书

技术领域

本发明属于医学检测领域，涉及Cystatin S和CYFRA21-1在制备诊断和预示食管癌标志物中的应用。

背景技术

食管癌是世界上常见的恶性肿瘤之一。我国是世界上食管癌发生率和死亡率最高的国家，其死亡率位居全国恶性肿瘤死亡率的第四位。早期食管癌的症状不显著，大部分食管癌患者确诊时已经是中晚期。早期食管癌手术治疗后，5年生存率能够达到80%以上。因此对于食管癌的早发现以及早治疗是改善食管癌患者生存率的最佳方式。

目前对于食管癌的诊断主要依赖于影像学和细胞学等方法。随着分子生物学的发展，肿瘤分子标志物的使用越来越广泛。寻找到食管癌相关的肿瘤标志物对于实现食管癌患者的早发现和早治疗具有十分重要的意义。鳞癌抗原（SCC）抗原和癌胚抗原（CEA）是目前常见的用于食管癌诊断的肿瘤分子标志物，但是其灵敏度偏低，无法满足临床需要。在过去的四十年中，对于食管癌的治疗的模式发生了重大的变化，例如手术治疗方法和化疗方法，以及放疗方法的综合使用。随着治疗方法的创新，在临床上食管癌患者的五年生存率有了显著的提高。然而在临床上，即使处于同一病理分期的患者表现出差异显著的生存率。

因此寻找到新的肿瘤标志物或者肿瘤标志物的新的联合，对提高食管癌的诊断灵敏度和特异性具有非常重要的价值，帮助医生对于患者进行个体化治疗，并为食管癌早期发现、及时干预及疗效评估和术后复发转移监控奠定基础。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种半胱氨酸蛋白酶抑制剂S（Cystatin S）和细胞角蛋白19片段21-1（CYFRA21-1）在制备诊断和预示食管癌标志物中的应用；本发明的目的之二在于提供食管癌标志物的捕获剂；本发明的目的之三在于提供含有上述捕获剂的试剂盒；本发明的目的之四在于提供试剂盒建立计算诊断和预示食管癌阈值的方法。

为达到上述目的，本发明提供如下技术方案：

1.半胱氨酸蛋白酶抑制剂S和细胞角蛋白19片段21-1在制备诊断和预示食管癌的标志物中的应用，所述半胱氨酸蛋白酶抑制剂S的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述细胞角蛋白19片段21-1的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。

优选的，所述诊断和预示为诊断、疗效评估或转移复发监控。

2.食管癌标志物的捕获剂，所述标志物为半胱氨酸蛋白酶抑制剂S和细胞角蛋白19片段21-1，所述半胱氨酸蛋白酶抑制剂S的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述细胞角蛋白19片段21-1的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。

优选的，所述捕获剂为识别半胱氨酸蛋白酶抑制剂S和细胞角蛋白19片段21-1的特异性抗体。

3.含有权利要求3或4所述捕获剂的试剂盒。

优选的，所述试剂盒为检测血清中半胱氨酸蛋白酶抑制剂S和细胞角蛋白19片段21-1浓度的试剂盒。

更优选的，所述试剂盒为酶联免疫检测试剂盒。

更优选的，所述试剂盒含有包被有单克隆抗体的固相载体、生物素标记的多克隆抗体和显色底物。

最优选的，所述单克隆抗体为鼠抗人Cystatin S单克隆抗体，所述多克隆抗体为兔抗人Cystatin S多克隆抗体，所述显色底物为四甲基联苯胺。

4.利用所述试剂盒建立计算诊断和预示食管癌阈值的方法，用所述试剂盒检测半胱氨酸蛋白酶抑制剂S和细胞角蛋白19片段21-1浓度，然后利用P=exp（-6.123+0.051X1+2.108X2）/[1+exp（-6.123+0.051X1+2.108X2）]计算阈值P，当P＞0.5时，判断为阳性；当P≤0.5时，判断为阴性；

其中X1为Cystatin S的浓度，单位为pg/mL；X2为CYFRA21-1的浓度，单位为ng/mL。

本发明的有益效果：本发明公开了诊断和预示食管癌的新标志物，即将Cystatin S和CYFRA21-1联合用于制备诊断和预示食管癌的标志物，通过联合两个标志物检测食管癌，提高了诊断的灵敏度和特异性；本发明还公开了检测食管癌标志物的捕获剂，将捕获剂与常规试剂组成检测试剂盒，组成的试剂盒具有使用方便，重复性好，便于携带等特点，可用于食管癌的早期诊断、食管癌的疗效评估或食管癌移转复发监控等，其诊断食管癌的灵敏度为

79.6%，特异性为90.8%，并且检测结果早于临床症状，为医生提前治疗和干预提供指导。

附图说明