[发明专利]检测罗丹明B的胶体金检测卡、其制备方法及应用

权利要求书

1.一种检测罗丹明B的胶体金检测卡的制备方法，其包括制备金标垫（8），所述金标垫（8）的制备包括：用含金标抗罗丹明B单克隆抗体的金标蛋白工作液喷涂金标垫，其中所述金标蛋白工作液包含体积比为0.5%～2%的SDS-L和pH7.4的0.02M磷酸盐缓冲液。

2.根据权利要求1所述的方法，所述金标蛋白工作液包含体积比为1%～2%的SDS-L和pH7.4的0.02M磷酸盐缓冲液。

3.根据权利要求1或2所述的方法，所述金标蛋白工作液还包含0.1‰g/ml PVA、0.1‰g/ml BSA、0.3‰g/ml PEG20000和5%g/ml蔗糖。

4.根据权利要求1至3中任一项所述的方法，所述金标抗罗丹明B单克隆抗体的制备包括：

A.使用0.01%g/ml氯金酸水溶液和1%g/ml柠檬酸钠水溶液制备胶体金溶液，其中0.01%g/ml氯金酸水溶液：1%g/ml柠檬酸钠=（10～1000）mL：（0.2～20）mL；

B.用所制备的胶体金溶液标记罗丹明B单克隆抗体，其中所使用的胶体金溶液：0.75mg/mL罗丹明B单克隆抗体：1%g/ml PEG20000：10%g/ml BSA=（10～1000）mL：（150～15000）μg：（1～100）mL：（1～100）mL。

5.根据权利要求1-4中任一项所述的方法，其中，

胶体金溶液制备中，0.01%g/ml氯金酸水溶液：1%g/ml柠檬酸钠=100mL：2mL；用所制备的胶体金溶液标记罗丹明B单克隆抗体中，所使用的胶体金溶液：0.75mg/mL罗丹明B单克隆抗体：1%g/ml PEG20000：10%g/ml BSA=100mL：1.5mg：10mL：10mL。

6.根据权利要求1-5中任一项所述的方法，其还包括制备硝酸纤维素膜（7），所述硝酸纤维素膜（7）的制备包括在硝酸纤维素膜上喷涂罗丹明B抗原溶液和羊抗鼠IgG溶液，形成两条平行线作为检测线（10）和质控线（11），其中罗丹明B抗原溶液为含罗丹明B抗原的pH为7.2的0.02M磷酸盐缓冲液，且10.7mg/mL罗丹明B抗原的体积：0.02M的磷酸盐缓冲液的体积为1：30至1：42，羊抗鼠IgG溶液为含羊抗鼠IgG的pH为7.2的0.02M的磷酸盐缓冲液，且7.5mg/mL羊抗鼠IgG的体积：0.02M的磷酸盐缓冲液的体积为1：3至1：5。

7.如权利要求6所述的方法，其中10.7mg/mL罗丹明B抗原的体积：0.02M的磷酸盐缓冲液的体积为1：35，7.5mg/mL羊抗鼠IgG的体积：0.02M的磷酸盐缓冲液的体积为1：4。

8.如前述任一项权利要求所述的方法，其还包括制备样品垫（9），所述样品垫（9）的制备包括用pH7.4的0.05M Tris缓冲液处理样品垫。

9.如前述任一项权利要求所述的方法，其还包括

制备吸水纸（6）；

将吸水纸（6）、硝酸纤维素膜（7）、金标垫（8）、样品垫（9）粘贴在底板（5）上，形成金标试纸条（2）；和

将金标试纸条（2）装入检测卡壳体（1）内，使样品垫（9）的位置正对检测卡壳体（1）的加样孔（3），硝酸纤维素膜（7）的位置正对检测卡壳体（1）的观测孔（4）。

10.由权利要求1-9中任一项所述的方法制备的罗丹明B的胶体金检测卡。